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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 求助各位，总黄酮含量测定方法用比色法和HPLC哪个更合适呢？
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与 2012-03-09 10:29:38
xiaoxiao270(PhEPI+1): 很好的回答 2012-03-11 20:39:02
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？

HPLC测总黄酮是有先例的，国外文献有报道。
基本原理：利用黄酮类物质的共性，存在两个特征吸收峰，一个在280nm左右，一个在340nm左右；从而判断HPLC图谱上出的各峰是否属于黄酮类化合物；把属于黄酮类化合物的峰的峰面积算总和，即为总黄酮峰面积，与标准物质（可根据实际情况选择结构类似黄酮做为对照品）峰面积换算而得总黄酮含量。
前提：HPLC的检测器为DAD检测器，能对每个出峰进行全波长吸收扫描。
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一艘船航行在大海上！
11楼2012-03-09 10:11:23
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:38:37
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？

具体实例可参考：
Zeraik等采用的方法
    HPLC法，根据黄酮类化合物的共性（在230-280nm处，以及300-350nm处分别各有一个最大吸收峰），将样品进行RP-HPLC-UV/DAD分析，选择在上述两段波长处有最大吸收峰的色谱峰（推定为黄酮化合物），将它们在330nm波长下检测到的峰面积叠加作为总黄酮的峰面积，以芦丁作为对照品，采用外标法计算总黄酮的含量。

参考文献：
Zeraik, M. L. and J. H. Yariwake. Quantification of isoorientin and total flavonoids in Passiflora edulis fruit pulp by HPLC-UV/DAD[J]. Microchem J.,2010,96(1): 86-91.
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一艘船航行在大海上！
12楼2012-03-09 10:29:30
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shuanger

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测总黄酮，还是比色更合适吧
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13楼2012-03-09 14:33:43
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踏径

木虫 (小有名气)
学习中
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走走停停再走
14楼2012-03-11 18:18:59
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fang209399

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:39:18
比色法吧，测总黄酮HPLC目前不是主流，单体黄酮用HPLC测，况且岛津—LC20貌似不是全波长的。
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15楼2012-03-11 20:27:01
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thq7230223

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

比色法是测总黄酮含量，而HPLC是测单体黄酮含量，性质不一样的，我做过用芦丁对照品紫外分光光度计测总黄酮含量
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16楼2012-08-30 23:08:34
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紫衣轻骑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

测总黄酮一般比色法，但误差稍大。如果知道被测物中黄酮类化合物的话，HPLC比较准确！
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17楼2012-10-18 18:17:53
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