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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 【交流】比色法测总黄酮加亚硝酸钠和氢氧化钠的原因
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三脉紫菀

木虫 (小有名气)

[交流] 【交流】比色法测总黄酮加亚硝酸钠和氢氧化钠的原因 已有7人参与

加亚硝酸钠，有的人说是抗氧剂，还原被氧化的酚羟基，也有人说是稳定剂。加氢氧化钠，是使其红移，加强荧光吗？谢谢大家。
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总黄酮 测总黄酮含量研究

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1楼 2009-10-27 21:41:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

三脉紫菀

木虫 (小有名气)
★
472514568(金币+1,VIP+0):给个红包奖励！ 12-8 12:41
加强荧光，严格说是不合理的。我们比色是测的吸光度，不是荧光强度，荧光是激发光谱，吸光度是吸光光谱，两者是不一样的，但两者都可以用来测总黄酮含量。比色法也就是可见分光光度法，加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基，使其能与铝离子络合，并且提供一个碱性环境（在酸性环境中铝离子不与邻二酚羟基络合），络合之后，产生一个稳定的特征吸收峰，但是在这个波长之下，杂质干扰较多，因此加氢氧化钠使吸收峰红移，避免杂质干扰（杂质不红移）。红移原因，碱性使酚羟基解离，p-π共轭，红移。（Ⅰ带Ⅱ带具体分析）。自己理解，欢迎指正。
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8楼2009-11-01 18:10:40
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joding

铁虫 (初入文坛)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 12-14 22:55
加入亚硝酸钠因为其具有还原性，既能还原被氧化了的酚羟基，又能防止黄酮在测量过程中被氧化；加入氢氧化钠是因为氢氧化钠能将黄酮中的-C-O-C-键水解，形成邻二酚结构与铝离子结合，第二提供碱性环境使酚羟基处于解离状态。
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细节才是完美！
11楼2009-12-11 22:13:38
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psm520

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
8楼: Originally posted by 三脉紫菀 at 2009-11-01 18:10:40
加强荧光，严格说是不合理的。我们比色是测的吸光度，不是荧光强度，荧光是激发光谱，吸光度是吸光光谱，两者是不一样的，但两者都可以用来测总黄酮含量。比色法也就是可见分光光度法，加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基 ...

你好，在做总黄酮含量测定时，用5%亚硝酸钠-10%硝酸铝-1mol/L氢氧化钠显色系统制作芦丁的标准曲线，然后在紫外上测最大吸收峰，结果最大吸收峰在272nm左右，而不是大部分文献上说的510nm。而且在510nm左右扫描它都没有吸收峰，请问可能是什么原因造成的？要如何解决呢？谢谢
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17楼2013-07-22 10:59:46
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070918

木虫 (著名写手)
★ ★
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472514568(金币+1,VIP+0):给个红包奖励！ 12-8 12:41
亚硝酸钠的抗氧化性就是稳定性，氢氧化钠提供碱性条件可以，是很好的发生络合反应
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天道酬勤
10楼2009-12-08 09:43:36
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普通回帖

472514568

至尊木虫 (职业作家)

小木虫议政大臣兼协办大学士
★ ★
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ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢指点迷津！ 10-27 22:34
加亚硝酸钠其实可以说是抗氧剂也可以说是稳定剂，因为亚硝酸钠是通过它的抗氧化作用来发挥稳定剂的作用 ，加氢氧化钠的作用就是你所说的 加强荧光
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保持心灵的纯洁
2楼2009-10-27 22:30:34
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xorlins

新虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 11-1 18:03
加亚硝酸钠是为了增强溶液的稳定，加氢氧化钠是因为黄酮类化合物在氢氧化钠水溶液中长生黄至橙色的颜色
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3楼2009-10-27 23:41:21
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三脉紫菀

木虫 (小有名气)
为什么氢氧化钠能够加强荧光？机理是什么?xiexie
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4楼2009-10-29 13:34:37
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三脉紫菀

木虫 (小有名气)
搞明白啦
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5楼2009-10-30 18:23:32
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ay45

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也做黄酮类化合物的检测    之前不知道这个原因   学到了    那个机理可不可以分享下呀   谢谢！！
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6楼2009-11-01 12:43:39
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xiebb

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 11-1 18:03
碱化，呈离子状态，共轭性增强
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7楼2009-11-01 14:29:52
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qzhydzhgy

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
谢谢楼上的回复！
我最近也因为这个很困惑   看完你的回答明白多了！
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9楼2009-12-07 22:41:28
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