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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 【交流】比色法测总黄酮加亚硝酸钠和氢氧化钠的原因
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joding

铁虫 (初入文坛)
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 12-14 22:55
加入亚硝酸钠因为其具有还原性，既能还原被氧化了的酚羟基，又能防止黄酮在测量过程中被氧化；加入氢氧化钠是因为氢氧化钠能将黄酮中的-C-O-C-键水解，形成邻二酚结构与铝离子结合，第二提供碱性环境使酚羟基处于解离状态。
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细节才是完美！
11楼2009-12-11 22:13:38
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wudiliusha

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做标准曲线的时候都是这个条件。
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认真生活，快乐工作。
12楼2009-12-14 16:44:20
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kelong2008

测定黄酮方法讨论：亚硝酸钠、硝酸铝法与三氯化铝法比较

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
测定黄酮方法讨论：亚硝酸钠、硝酸铝法与三氯化铝法比较
最近做总黄酮检查，对于以上两种方法不知用哪种好？希望大家多指点。
亚硝酸钠、硝酸铝法：加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基，使其能与铝离子络合，并且提供一个碱性环境（在酸性环境中铝离子不与邻二酚羟基络合），络合之后，产生一个稳定的特征吸收峰，但是在这个波长之下，杂质干扰较多，因此加氢氧化钠使吸收峰红移，避免杂质干扰（杂质不红移）。红移原因，碱性使酚羟基解离，p-π共轭，红移。（Ⅰ带Ⅱ带具体分析）。
   有人认为凡具有邻苯二羟基的物质，均能用此法进行显示测量，故有很大的误差。
三氯化铝法：对黄酮类物质反应强烈，而对酚酸类、原花色素的反应很小，该法对黄酮类化合物的专属性较强。
     可是我用这种方法测定后发现黄酮含量只在2%~4%之间，与所查到的文献含量有很大的区别。
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13楼2010-07-01 08:47:39
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lpl1937

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可是我用显色法检测黄酮时，加上硝酸铝就变浑浊了，加上氢氧化钠后，过段时间就有絮状沉淀了 怎么回事啊
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人性直节生来瘦，自许高材老更刚。
14楼2012-08-08 10:04:39
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liangxingqiu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
17417975楼: Originally posted by kelong2008 at 2010-07-01 08:47:39
测定黄酮方法讨论：亚硝酸钠、硝酸铝法与三氯化铝法比较
最近做总黄酮检查，对于以上两种方法不知用哪种好？希望大家多指点。
亚硝酸钠、硝酸铝法：加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基，使其能与铝离子络合，并且提供一 ...

这几天测定样品里的总黄酮含量，用的是比色法，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色 体系，，无水乙醇为溶剂，加入亚硝酸钠时溶液出现白色乳状物，类似于沉淀，不知道是什么原因，各位虫子们，你们测黄酮时有没有出现这种情况呢？
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15楼2012-10-26 21:28:06
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1210272956

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 三脉紫菀 at 2009-11-01 18:10:40
加强荧光，严格说是不合理的。我们比色是测的吸光度，不是荧光强度，荧光是激发光谱，吸光度是吸光光谱，两者是不一样的，但两者都可以用来测总黄酮含量。比色法也就是可见分光光度法，加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基 ...

你好！看你的回帖感觉你好专业的，我有个疑问请教一下你，就是加10%的氢氧化钠与加4%氢氧化钠对结果有什么影响？望赐教
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16楼2013-06-25 20:21:15
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psm520

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 三脉紫菀 at 2009-11-01 18:10:40
加强荧光，严格说是不合理的。我们比色是测的吸光度，不是荧光强度，荧光是激发光谱，吸光度是吸光光谱，两者是不一样的，但两者都可以用来测总黄酮含量。比色法也就是可见分光光度法，加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基 ...

你好，在做总黄酮含量测定时，用5%亚硝酸钠-10%硝酸铝-1mol/L氢氧化钠显色系统制作芦丁的标准曲线，然后在紫外上测最大吸收峰，结果最大吸收峰在272nm左右，而不是大部分文献上说的510nm。而且在510nm左右扫描它都没有吸收峰，请问可能是什么原因造成的？要如何解决呢？谢谢
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17楼2013-07-22 10:59:46
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李诺

新虫 (小有名气)
同问

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18楼2017-08-02 14:23:02
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18285145396

新虫 (初入文坛)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by liangxingqiu at 2012-10-26 21:28:06
这几天测定样品里的总黄酮含量，用的是比色法，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色 体系，，无水乙醇为溶剂，加入亚硝酸钠时溶液出现白色乳状物，类似于沉淀，不知道是什么原因，各位虫子们，你们测黄酮时有没有出现这 ...

我做的是红色沉淀，请大神指点

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19楼2017-09-19 23:42:11
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18285145396

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by psm520 at 2013-07-22 10:59:46
你好，在做总黄酮含量测定时，用5%亚硝酸钠-10%硝酸铝-1mol/L氢氧化钠显色系统制作芦丁的标准曲线，然后在紫外上测最大吸收峰，结果最大吸收峰在272nm左右，而不是大部分文献上说的510nm。而且在510nm左右扫描它都 ...

您好，我做的是506nm，是不是显色过程有问题

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20楼2017-09-19 23:43:59
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