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三脉紫菀

木虫 (小有名气)

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[交流] 【交流】比色法测总黄酮加亚硝酸钠和氢氧化钠的原因已有7人参与

加亚硝酸钠，有的人说是抗氧剂，还原被氧化的酚羟基，也有人说是稳定剂。加氢氧化钠，是使其红移，加强荧光吗？谢谢大家。

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1楼2009-10-27 21:41:52

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三脉紫菀

木虫 (小有名气)

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472514568(金币+1,VIP+0):给个红包奖励！ 12-8 12:41

加强荧光，严格说是不合理的。我们比色是测的吸光度，不是荧光强度，荧光是激发光谱，吸光度是吸光光谱，两者是不一样的，但两者都可以用来测总黄酮含量。比色法也就是可见分光光度法，加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基，使其能与铝离子络合，并且提供一个碱性环境（在酸性环境中铝离子不与邻二酚羟基络合），络合之后，产生一个稳定的特征吸收峰，但是在这个波长之下，杂质干扰较多，因此加氢氧化钠使吸收峰红移，避免杂质干扰（杂质不红移）。红移原因，碱性使酚羟基解离，p-π共轭，红移。（Ⅰ带Ⅱ带具体分析）。自己理解，欢迎指正。

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8楼2009-11-01 18:10:40

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joding

铁虫 (初入文坛)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 12-14 22:55

加入亚硝酸钠因为其具有还原性，既能还原被氧化了的酚羟基，又能防止黄酮在测量过程中被氧化；加入氢氧化钠是因为氢氧化钠能将黄酮中的-C-O-C-键水解，形成邻二酚结构与铝离子结合，第二提供碱性环境使酚羟基处于解离状态。

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细节才是完美！

11楼2009-12-11 22:13:38

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psm520

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 三脉紫菀 at 2009-11-01 18:10:40
加强荧光，严格说是不合理的。我们比色是测的吸光度，不是荧光强度，荧光是激发光谱，吸光度是吸光光谱，两者是不一样的，但两者都可以用来测总黄酮含量。比色法也就是可见分光光度法，加亚硝酸钠还原被氧化的酚羟基 ...

你好，在做总黄酮含量测定时，用5%亚硝酸钠-10%硝酸铝-1mol/L氢氧化钠显色系统制作芦丁的标准曲线，然后在紫外上测最大吸收峰，结果最大吸收峰在272nm左右，而不是大部分文献上说的510nm。而且在510nm左右扫描它都没有吸收峰，请问可能是什么原因造成的？要如何解决呢？谢谢

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17楼2013-07-22 10:59:46

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