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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » cDNA如何扩增？
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你大舅你二舅

铜虫 (小有名气)

[求助] cDNA如何扩增？ 已有4人参与

小虫已经得到cDNA了，快用完了，想问各位可不可以用cDNA扩增cDNA，如果可以，在后续的PCR中对结果有影响吗？

[ Last edited by silicare on 2014-2-27 at 08:00 ]
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爱拼才会赢
1楼 2014-02-24 09:31:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:13:00
....
    这样说吧，你木有搞清楚概念
    cDNA也就是体内你取材时间点的RNA表达谱，主要用处无非就是以下几点：
    1. 检测基因表达量
    2. 克隆想要的基因
    3. 构建文库
    你当然可以扩增cDNA，但是针对任意一种以上的用处都没有意义。首先，扩增后你就破坏了原始mRNA的表达水平，你当然没法定量。其次，克隆基因，更不可取，cDNA是一个集合，而不是单个基因的富集。你没有可选取的引物来做。最后，构建文库，更不可能。
    所以，想得到较多cDNA，只要你RNA提的足够，多次反转录即可。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

你大舅你二舅
Let God do with it as He wills
10楼2014-02-26 13:50:59
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你大舅你二舅

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-26 13:50:59
....
    这样说吧，你木有搞清楚概念
    cDNA也就是体内你取材时间点的RNA表达谱，主要用处无非就是以下几点：
    1. 检测基因表达量
    2. 克隆想要的基因
    3. 构建文库
    你当然可以扩增cDNA，但是 ...

小虫本科是应用化学，现在也是～～～，因导师做的是分子生物学，所以现在在做这个，完全是门外汉。
您的见解让小虫获益匪浅。

[ 发自小木虫客户端 ]
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爱拼才会赢
11楼2014-02-26 23:21:43
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普通回帖

sanmonte
★
你大舅你二舅(金币+1): 谢谢参与
支持
2楼2014-02-24 11:12:13
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doublehaohao
★
你大舅你二舅(金币+1): 谢谢参与
3楼2014-02-24 11:29:58
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lomoneriay
★
你大舅你二舅(金币+1): 谢谢参与
4楼2014-02-24 11:31:26
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你怎样扩增啊？还是重新反转一些方便。
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hehe
5楼2014-02-24 12:07:10
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yingying1588
6楼2014-02-24 22:35:36
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:12:39
其实你可以稀释cDNA试一下，可以稀释10倍，然后再进行PCR，一般也可以扩增出来的
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
7楼2014-02-25 13:42:16
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那年书生

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
你大舅你二舅: 金币+1, ★★★很有帮助, 嗯，其他虫友也这么说，，， 2014-02-27 09:23:32
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:12:46
应该是不行的，因为cDNA是由RNA反转录来的，如果你用cDNA扩的话，得到的应该是DNA而不是cDNA.
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当你苦逼的选择了这个专业，你便只能风雨兼程的苦逼走下去，做个不苦逼的苦逼……
8楼2014-02-26 09:49:02
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傻小花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
你大舅你二舅: 金币+1, ★★★很有帮助, 嘿嘿，知道了，谢谢。 2014-02-27 09:24:49
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:12:52
不行，从RNA反转录过来的DNA叫cDNA，从cDNA扩增出的只能是DNA
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9楼2014-02-26 10:10:42
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