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你大舅你二舅

铜虫 (小有名气)

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[求助] cDNA如何扩增？已有4人参与

小虫已经得到cDNA了，快用完了，想问各位可不可以用cDNA扩增cDNA，如果可以，在后续的PCR中对结果有影响吗？

[ Last edited by silicare on 2014-2-27 at 08:00 ]

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爱拼才会赢

1楼2014-02-24 09:31:46

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atlanticwi

金虫 (正式写手)

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gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:13:00

....
这样说吧，你木有搞清楚概念
cDNA也就是体内你取材时间点的RNA表达谱，主要用处无非就是以下几点：
1. 检测基因表达量
2. 克隆想要的基因
3. 构建文库
你当然可以扩增cDNA，但是针对任意一种以上的用处都没有意义。首先，扩增后你就破坏了原始mRNA的表达水平，你当然没法定量。其次，克隆基因，更不可取，cDNA是一个集合，而不是单个基因的富集。你没有可选取的引物来做。最后，构建文库，更不可能。
所以，想得到较多cDNA，只要你RNA提的足够，多次反转录即可。