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你大舅你二舅

铜虫 (小有名气)

[求助] cDNA如何扩增? 已有4人参与

小虫已经得到cDNA了,快用完了,想问各位可不可以用cDNA扩增cDNA,如果可以,在后续的PCR中对结果有影响吗?

[ Last edited by silicare on 2014-2-27 at 08:00 ]
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流! 2014-03-30 17:13:00
....
    这样说吧,你木有搞清楚概念
    cDNA也就是体内你取材时间点的RNA表达谱,主要用处无非就是以下几点:
    1. 检测基因表达量
    2. 克隆想要的基因
    3. 构建文库
    你当然可以扩增cDNA,但是针对任意一种以上的用处都没有意义。首先,扩增后你就破坏了原始mRNA的表达水平,你当然没法定量。其次,克隆基因,更不可取,cDNA是一个集合,而不是单个基因的富集。你没有可选取的引物来做。最后,构建文库,更不可能。
    所以,想得到较多cDNA,只要你RNA提的足够,多次反转录即可。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Let God do with it as He wills
10楼2014-02-26 13:50:59
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查看全部 14 个回答

你大舅你二舅(金币+1): 谢谢参与
支持
2楼2014-02-24 11:12:13
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你怎样扩增啊?还是重新反转一些方便。
hehe
5楼2014-02-24 12:07:10
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-30 17:12:39
其实你可以稀释cDNA试一下,可以稀释10倍,然后再进行PCR,一般也可以扩增出来的
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
7楼2014-02-25 13:42:16
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