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黄文连

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 怎么找到基因相关的终止子已有1人参与

想要游离表达一个基因，想用菌种自身的启动子（TDH3），启动子大概是这个基因序列的前面1500BP，那么终止子怎么找啊？发夹结构来看吗？另外构建游离载体的时候是直接将启动子区序列和终止子序列PCR下来后连到一起，然后再插入目的基因吗？求各位帮帮忙，实在做不下去了，太多东西不懂了，万分感激……

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1楼 2014-02-21 16:47:38

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鬼羽帝魂

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-22 21:32:53

终止子在所需要表达的基因后面。
构建载体的时候，按这个顺序：启动子--基因--终止子。

一般的话，不需要PCR扩增，因为启动子两端的酶切位点基本相同，酶切连接就行。不一样的需要扩增。

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