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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC内标法方法学验证
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like2010

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC内标法方法学验证

请问，HPLC内标法方法学验证时，（1）有内标并且已确定，没有对照品能不能做方法学，能做的话该如何做？如线性和范围、回收率等。（2）有内标并且已确定，矫正因子已知道，没有对照品能不能做方法学，能做的话该如何做？如线性与范围、回收率等。谢谢！
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1楼 2014-02-18 16:32:33
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
like2010: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-02-19 10:37:19
PSA: 金币+2, 3u 2014-02-20 10:16:17
like2010: 金币+9 2014-03-03 11:33:11
楼主，第一个估计不能做，第二个知道校正因子，可以用供试品代替对照品做，具体方法可以参考《药典》附录，举个例子，线性可以根据你供试品和内标的100%浓度，把它分别配成浓度为50%、80%、100%、120%、150%这五个点（通常范围是这样，你也可以根据实际情况扩大浓度范围，但最少是5个点），计算线性的相关系数。
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2楼2014-02-19 09:29:24
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
★
PSA: 金币+1, 谢谢您的科学严谨 2014-02-20 10:16:38
楼主，有一个地方需要改正一下：“线性可以根据你供试品和内标的100%浓度”改成“线性可以根据你供试品的100%浓度”。祝楼主工作顺利。
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3楼2014-02-19 09:47:07
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like2010

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2014-02-19 09:29:24
楼主，第一个估计不能做，第二个知道校正因子，可以用供试品代替对照品做，具体方法可以参考《药典》附录，举个例子，线性可以根据你供试品和内标的100%浓度，把它分别配成浓度为50%、80%、100%、120%、150%这五个点 ...

谢谢，有没有看到用改变内标的浓度，供试品的浓度不变做线性的，可以这样做吗？
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4楼2014-02-19 10:31:49
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by like2010 at 2014-02-19 10:31:49
谢谢，有没有看到用改变内标的浓度，供试品的浓度不变做线性的，可以这样做吗？...

楼主，应该不可以吧，因为你测算的是供试品，内标的作用是为了避免在样品配制的时候出现差错。
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5楼2014-02-19 10:35:02
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voyager86

铁虫 (小有名气)
★
PSA: 金币+1, 3u 2014-02-20 10:16:49
你可以用含量比较高的原料药做，含量不得小于99%，有了标准品标定一下就行
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6楼2014-02-19 13:23:07
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like2010

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by voyager86 at 2014-02-19 13:23:07
你可以用含量比较高的原料药做，含量不得小于99%，有了标准品标定一下就行

没有标准品啊！新药~
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7楼2014-02-19 17:27:11
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voyager86

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by like2010 at 2014-02-19 17:27:11
没有标准品啊！新药~...

没有标准品，你怎么定量？没有标准品就得自制标准品啊，结构确证，含量标定
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8楼2014-02-20 09:11:32
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like2010

银虫 (小有名气)
★
PSA: 金币+1, 3u 2014-02-20 10:17:00
引用回帖:
8楼: Originally posted by voyager86 at 2014-02-20 09:11:32
没有标准品，你怎么定量？没有标准品就得自制标准品啊，结构确证，含量标定...

如题有矫正因子，可以定量。标准品不是说制就能制的，还在研究，现在就想知道能不能方法学，谢谢！
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9楼2014-02-20 10:10:37
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voyager86

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by like2010 at 2014-02-20 10:10:37
如题有矫正因子，可以定量。标准品不是说制就能制的，还在研究，现在就想知道能不能方法学，谢谢！...

没有标准品怎么定量，用什么对照？你校正因子是网上查的吗？再说了定量测的是含量，不是纯度
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10楼2014-02-20 15:49:11
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