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xixi_pds7

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[求助] 求助重建质粒的问题已有1人参与

我手头的质粒不合适，要重新换promoter和抗性筛选标记，所以，想问下如何更换？

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1楼2014-01-16 12:17:58

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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+5, 鼓励交流！ 2014-01-18 16:11:13

1.如果这个载体与其他的载体是一个系列的（启动子，筛选标记基因都一样，基因不一样），可以看看其他的载体用。
2.如果不是，那么可以设计引物分别扩增启动子和筛选标记，连接更换。
3.如果其他载体上的启动子两端、筛选标记两端的酶切位点与你现在的载体一样，可以直接酶切、连接更换。

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2楼2014-01-16 15:00:49

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xixi_pds7

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-01-16 15:00:49
1.如果这个载体与其他的载体是一个系列的（启动子，筛选标记基因都一样，基因不一样），可以看看其他的载体用。
2.如果不是，那么可以设计引物分别扩增启动子和筛选标记，连接更换。
3.如果其他载体上的启动子两端 ...

第一：您的意思是说，把我的目标基因片段切下来，然后插入另一个载体上么？
第二：启动子跟筛选标记是从另一个vector上切么？
第三，酶切点不一样

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3楼2014-01-17 14:25:04

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