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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 你们的荧光定量检测引物扩增的标准曲线问题！求指教
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学术问题

银虫 (小有名气)

[求助] 你们的荧光定量检测引物扩增的标准曲线问题！求指教 已有3人参与

你们检测引物的扩增效率的时候做的标准曲线 是直接在荧光定量的机子（我们是CFX96）上直接显示，还是拿到CT值后再用其他软件或者EXCEL做图得到标准曲线，斜率什么的，计算扩增效率。直接在仪器的那个软件上能直接显示标准曲线吗？？？
求助啊！！！
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微生物小硕
1楼 2014-01-13 17:13:26
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-15 08:36:02
我们用的ABI  Step one plus做的相对标准曲线，机子上虽然显示单我们还是利用excel做的。这样可以剔除差异大或没有扩增的数据。结果与机子上的结果稍有差异。
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hehe
2楼2014-01-14 09:49:32
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zll306

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-28 18:06:30
学术问题: 金币+5 2014-05-23 15:25:10
每种仪器上都可以自动生成标准曲线，有些荧光定量PCR仪器没有给出扩增效率，需自行计算。一般不需导出数据来做标曲，多此一举。仪器上已经分析的很清楚了，适当调节阈值等参数即可。希望对你有用。
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3楼2014-01-15 20:18:23
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学术问题

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zll306 at 2014-01-15 20:18:23
每种仪器上都可以自动生成标准曲线，有些荧光定量PCR仪器没有给出扩增效率，需自行计算。一般不需导出数据来做标曲，多此一举。仪器上已经分析的很清楚了，适当调节阈值等参数即可。希望对你有用。

好的  谢谢啊
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微生物小硕
4楼2014-01-17 09:16:29
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Be_Abuse

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-28 18:06:39
学术问题: 金币+5 2014-05-23 15:25:35
CFX96我非常熟悉，建议用仪器自带的做，这样图也好看，另外对于加样误差的完全可以去除，也非常的方便，可以得到R值和扩增效率等。
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5楼2014-01-17 10:51:57
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