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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 不同载体上的GFP序列是否一样
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

[求助] 不同载体上的GFP序列是否一样 已有5人参与

最近在构载体，想带上GFP标签，实验室已有的质粒上的GFP序列不清楚，不同的载体上GFP序列一样吗？可以在NCBI上查到吗？因为目的基因和GFP只能分步连到酵母表达载体上去，感觉没有GFP序列怎么设计引物？小白一个，特求助还请懂的人指点一下
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天道酬勤
1楼 2014-01-05 10:47:29
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-05 15:20:26
你可以下载几个带GFP的质粒的序列，然后自己比对看看，然后用你手头上已有的GFP序列为模板设计引物，

你具体是什么载体呢？
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-01-05 16:05:58
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随风飘摇11: 金币+2, ★有帮助, 因为我载体上的GFP序列不知道，但是想用这个作为模板扩，这样的话没有序列，引物该怎么设计？ 2014-01-05 11:01:31
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-01-05 12:43:40
很一样，RFP等相关蛋白开始序列基本一样，只在中间有差别

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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
2楼2014-01-05 10:56:09
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随风飘摇11: 金币+2, ★有帮助, 看了，发现有些不一样。最主要就是我手里有的载体上的GFP序列不知道 2014-01-05 15:43:39
你可以下载几个带GFP的质粒的序列，然后自己比对看看，然后用你手头上已有的GFP序列为模板设计引物，
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-01-05 15:20:26
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-05 16:05:58
你具体是什么载体呢？...

额，GFP应该是在瞬转表达载体上的，我找了找老师的博士论文上写的pT-GFP-MCS-COLD6最后连的是目的基因，我也不太懂这个是什么载体。现在就是想把它连同GFP转到酵母表达载体上，因为酶切位点不一样，没法直接切下来就酶连，现在就是不知道GFP序列，一筹莫展

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天道酬勤
5楼2014-01-05 16:49:48
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