【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有201人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

高一数学，女儿不会做，求高人指点已经有8人回复
求解谱高手啊！！！已经有20人回复
DGGE漏胶问题，求帮助？已经有5人回复
求高人指点：怎样和曾经联系过但是最后没有报考的导师再次联系？已经有9人回复
急！请高手帮忙解决几个A错误吧！不胜感激！已经有9人回复
bio-rad DGGE漏胶问题已经有8人回复
DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！已经有11人回复
DGGE切胶回收测序多个条带是同种菌或所有条带都是同种菌是怎么回事？已经有8人回复
DGGE胶浓度有问题，已经有4人回复
逆转录-pcr图，就解已经有22人回复
加热套怎么和控温器连接控制温度？请高人指点.帮帮忙已经有7人回复
低于材料禁带宽度的光子激发出电子空穴对？求高人指点！已经有23人回复
求高人指点 matlab 可以画 origin的break 图吗？已经有4人回复
DGGE ladder 或者 marker制作的问题已经有5人回复
请高手看看我的PCR图片已经有28人回复
真菌基因组DAN提取图片，求高人指点已经有20人回复
DGGE胶回收问题已经有13人回复
论文发表时，并列一作我放在第一位，对我影响会有多大？求高人指点已经有16人回复
【求助/交流】芽孢染色做不出来，望高人指点已经有21人回复
【求助】哪位高人指点下氯化物测定中的几个问题已经有6人回复

1楼2014-01-04 20:02:48

gyl121

新虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 199.3
散金: 137
红花: 1
帖子: 322
在线: 73.9小时
虫号: 2171715
注册: 2012-12-07
性别: GG
专业: 动物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:13:45

楼主，你应该把你的引物图谱也亮出来，这样才能看到更多的问题，才能排除；
DNA模板的浓度问题，模板纯度问题抑或有引物配比问题，没能形成特定条带

不经一番寒彻骨，怎得梅花扑鼻香？为科学进步不懈努力

2楼2014-01-05 13:18:03

抹脖丧

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 28.5
帖子: 29
在线: 11.8小时
虫号: 2205406
注册: 2012-12-25
专业: 病毒学

引用回帖:

2楼: Originally posted by gyl121 at 2014-01-05 13:18:03
楼主，你应该把你的引物图谱也亮出来，这样才能看到更多的问题，才能排除；
DNA模板的浓度问题，模板纯度问题抑或有引物配比问题，没能形成特定条带

谢谢你！PCR完跑琼脂糖胶条带清晰而且很亮，模板的浓度都是一百多，个别有二百多的（ng/微升），纯度用nanodrop测得都介于1.8-1.9之间（260/280）。
只有一次，我把CR产物纯化之后再跑胶，图片条带很清楚，但是所有泳道都一样了。都没有继续下去的动力了，不知道哪里出了问题

3楼2014-01-06 08:49:45

gyl121

新虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 199.3
散金: 137
红花: 1
帖子: 322
在线: 73.9小时
虫号: 2171715
注册: 2012-12-07
性别: GG
专业: 动物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-09 08:56:17

慢慢来嘛，我目前也碰到不少问题，你的模板是没问题的了，你应该注意体系，引物，酶等，这些也是很重要的，引物是自己设计的吗？听你的意思，好像是要找各样品不同的条带，多态性是吧？

不经一番寒彻骨，怎得梅花扑鼻香？为科学进步不懈努力

4楼2014-01-07 10:32:37

sdxlwxs

铁杆木虫 (职业作家)

应助: 9 (幼儿园)
金币: 8359.8
散金: 7319
红花: 18
沙发: 5
帖子: 3719
在线: 522.1小时
虫号: 981452
注册: 2010-03-25
性别: GG
专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-09 08:56:21

变性梯度选择的范围不合适吧，明显都跑到下面去了

5楼2014-01-07 11:13:24

抹脖丧

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 28.5
帖子: 29
在线: 11.8小时
虫号: 2205406
注册: 2012-12-25
专业: 病毒学

引用回帖:

4楼: Originally posted by gyl121 at 2014-01-07 10:32:37
慢慢来嘛，我目前也碰到不少问题，你的模板是没问题的了，你应该注意体系，引物，酶等，这些也是很重要的，引物是自己设计的吗？听你的意思，好像是要找各样品不同的条带，多态性是吧？

又试了一下同一块胶上跑纯化的和不纯化的，纯化的很清楚，初步推测是我用的酶不合适，下次换个酶试试
引物是我自己设计的，GC夹是文献上的，
是要看多态性
你用的是什么酶呀？

6楼2014-01-08 18:19:46

淼淼兮

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 121
帖子: 16
在线: 1.7小时
虫号: 2927393
注册: 2014-01-12
专业: 微生物资源与分类学

我也准备做DGGE请问前辈 PCR产物是怎么纯化的切胶回收？

7楼2014-01-12 10:42:45

抹脖丧

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 28.5
帖子: 29
在线: 11.8小时
虫号: 2205406
注册: 2012-12-25
专业: 病毒学

引用回帖:

7楼: Originally posted by 淼淼兮 at 2014-01-12 10:42:45
我也准备做DGGE请问前辈 PCR产物是怎么纯化的切胶回收？

不需要纯化，我是病急乱投医，是在找不到原因了，就想是不是PCR时用的mix不合适呢，所以切胶回收又跑了一下。你要做好失败的心理准备，而且是多次失败，祝你好运！

8楼2014-01-14 19:34:52