应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求高人指点，为什么我的DGGE图总是这样
81/1返回列表
查看: 1094  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

抹脖丧

新虫 (初入文坛)

[求助] 求高人指点，为什么我的DGGE图总是这样 已有2人参与

6%的胶，20-45%的变性梯度，片段330bp
求高人指点，为什么我的DGGE图总是这样
111111111111111111111111111.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-04 20:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyl121

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-05 15:13:45
楼主，你应该把你的引物图谱也亮出来，这样才能看到更多的问题，才能排除；
  DNA模板的浓度问题，模板纯度问题抑或有引物配比问题，没能形成特定条带
赞一下 回复此楼
不经一番寒彻骨，怎得梅花扑鼻香？为科学进步不懈努力
2楼2014-01-05 13:18:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抹脖丧

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyl121 at 2014-01-05 13:18:03
楼主，你应该把你的引物图谱也亮出来，这样才能看到更多的问题，才能排除；
  DNA模板的浓度问题，模板纯度问题抑或有引物配比问题，没能形成特定条带

谢谢你！PCR完跑琼脂糖胶条带清晰而且很亮，模板的浓度都是一百多，个别有二百多的（ng/微升），纯度用nanodrop测得都介于1.8-1.9之间（260/280）。
只有一次，我把CR产物纯化之后再跑胶，图片条带很清楚，但是所有泳道都一样了。都没有继续下去的动力了，不知道哪里出了问题
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-06 08:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyl121

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-09 08:56:17
慢慢来嘛，我目前也碰到不少问题，你的模板是没问题的了，你应该注意体系，引物，酶等，这些也是很重要的，引物是自己设计的吗？听你的意思，好像是要找各样品不同的条带，多态性是吧？
赞一下 回复此楼
不经一番寒彻骨，怎得梅花扑鼻香？为科学进步不懈努力
4楼2014-01-07 10:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sdxlwxs

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-09 08:56:21
变性梯度选择的范围不合适吧，明显都跑到下面去了
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-07 11:13:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抹脖丧

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gyl121 at 2014-01-07 10:32:37
慢慢来嘛，我目前也碰到不少问题，你的模板是没问题的了，你应该注意体系，引物，酶等，这些也是很重要的，引物是自己设计的吗？听你的意思，好像是要找各样品不同的条带，多态性是吧？

又试了一下同一块胶上跑纯化的和不纯化的，纯化的很清楚，初步推测是我用的酶不合适，下次换个酶试试
引物是我自己设计的，GC夹是文献上的，
是要看多态性
你用的是什么酶呀？
赞一下 回复此楼
6楼2014-01-08 18:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淼淼兮

新虫 (初入文坛)
我也准备做DGGE请问前辈 PCR产物是怎么纯化的 切胶回收？
赞一下 回复此楼
7楼2014-01-12 10:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抹脖丧

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 淼淼兮 at 2014-01-12 10:42:45
我也准备做DGGE请问前辈 PCR产物是怎么纯化的 切胶回收？

不需要纯化，我是病急乱投医，是在找不到原因了，就想是不是PCR时用的mix不合适呢，所以切胶回收又跑了一下。你要做好失败的心理准备，而且是多次失败，祝你好运！
赞一下 回复此楼
8楼2014-01-14 19:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 抹脖丧 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上意见出来了 +4 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 8/400 2026-08-29 14:50 by 黄鸟于飞Chao
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 14:23 by jCd0dEvKHShX
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 14:15 by jCd0dEvKHShX
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:13 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 13:41 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:29 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 10:18 by winsaint
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭