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新虫 (初入文坛)

[求助] 培养HepG-2细胞总是不贴壁,求经验! 已有1人参与

复苏HepG-2细胞,总是不贴壁!求问大家的经验,分析原因。
附件是细胞照片,背景中的白色透明圆点是细菌吗?因为怀疑是细菌又采取了以下各种措施也还是不贴壁,且还有白色圆点。
1.彻底用酒精、甲醛消毒灭菌,调试培养箱。
2.更换了培养液和小牛血清。
3.培养前未将细胞离心。(之前怀疑是离心机械力所致细胞损伤)
4.复苏不同冻存时间的细胞。
5.复苏冻存在零下-80度和液氮中的细胞,都不贴壁。
6.换了细胞培养室,仍然有白色圆点!
之前也出现过,没有白色圆点,但是细胞一开始贴壁,后来就不贴壁了。
同一培养箱中培养的其他细胞也出现白色圆点后,细胞就不长了。
个人分析是染菌,但是不知道是什么细菌,有没有什么有效的处理方法。
麻烦大家提供一下意见!感谢!
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江苏虞游

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看到图片我很奇怪哎,为什么是呈紫色的?
HepG-2很好养的啊,我们实验室是用DMEM养的,重新来过吧,复苏最原始的细胞,培养液等一套全部更换试试看,细胞培养瓶也用最新的
2楼2014-01-05 16:51:39
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