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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何悬浮培养贴壁型的细胞？
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晴朗的影子

金虫 (小有名气)

[求助] 如何悬浮培养贴壁型的细胞？

大家好，我刚接触细胞培养这一块，
培养的细胞是HepG2，贴壁型的，想悬浮培养，不让它贴壁，不知道有什么方法？
使用低吸附性的培养板，不知道可不可行？还有就是，有没有什么方法，可以将普通的培养板改性成不吸附细胞的？
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1楼 2012-04-09 11:05:09
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ilikeyou

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晴朗的影子: 金币+2, ★有帮助 2012-04-10 16:15:04
本帖内容被屏蔽
2楼2012-04-09 13:45:22
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aga0110125

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用没照过辐射的细菌用培养皿养，每天轻轻晃动
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3楼2012-04-09 16:43:54
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晴朗的影子

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aga0110125 at 2012-04-09 16:43:54:
用没照过辐射的细菌用培养皿养，每天轻轻晃动

你指的是未经过TC处理过的培养皿吗？请问你用过吗？效果如何
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4楼2012-04-09 20:28:29
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晴朗的影子

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ilikeyou at 2012-04-09 13:45:22:
细胞贴壁是因为细胞本身的性质，与培养板的关系不大，就是培养在玻片上，细胞也会贴壁的。建议把细胞装在试管中，使用37度摇床培养，可能会好点。但是如果贴壁细胞长期不贴壁，有可能会死，或者活性降低。

使用37度摇床，还需要5%的CO2环境吧？
实际上这样是挺好的，但是我们细胞培养室比较小，放不下摇床。
所以想到使用低吸附的培养板。。。。
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5楼2012-04-09 20:31:39
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aga0110125

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
晴朗的影子: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-04-10 16:15:15
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晴朗的影子 at 2012-04-09 20:28:29:
你指的是未经过TC处理过的培养皿吗？请问你用过吗？效果如何

我师姐用这个来短期培养ips，悬浮分化，不过如果ips长的过大，还是会沉下去贴壁的
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6楼2012-04-10 15:13:30
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晴朗的影子

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by aga0110125 at 2012-04-10 15:13:30:
我师姐用这个来短期培养ips，悬浮分化，不过如果ips长的过大，还是会沉下去贴壁的

恩，谢谢！这个短期是多长呢，有几天吧？
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7楼2012-04-10 16:16:08
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Camille宇

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以将含血清培养基跟无血清培养基按照1:1-1:3-1:7的比例来培养细胞，每次细胞密度达到1*106时说明细胞适应了当前的培养环境；当血清含量低于0.31%的时候，细胞一般就会悬浮起来了，周期一般要一个半月。因为悬浮跟贴壁是根据细胞生理特性决定的，所以不能简单直接悬浮或者是物理方面的改变。我现在也是要将贴壁的悬起来，这方法是从文献上看到的，我也在实验中，希望对你有用。
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加油，你最棒
8楼2013-10-12 10:24:13
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liujun1028

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

1、用超低吸附平皿corning有卖
2、Culture dishes were first coated with pol-
yHEMA [poly(2-hydroxyethyl methacrylate), P3932; Sigma] to
avoid attachment of cells to the bottom of the dish.
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9楼2013-10-12 20:46:44
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