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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 贴壁细胞中SOD,GPX,CAT,MDA活力的测定

请问一下各位,贴壁细胞中SOD,GPX,CAT,MDA活力是如何测定的?首先,裂解细胞的时候,大家用的是超声吗?超声的具体条件能讲解一下吗?由于我们实验室的变幅杆是破细菌用的,没有小号的,我打算用RIPA裂解液裂解细胞离心取上清做。由于我们用的药物量比较少,所以我只能用6孔板接种细胞,后再给药。但是这样子一个孔也只是加入150ul的裂解液。150ul的裂解液所得的细胞上清的量能够用于SOD,GPX,CAT,MDA这四种指标的检测吗?还有SOD,GPX,CAT最终浓度的单位是依据细胞总蛋白量,用U/毫克蛋白表示吗?还是依据上清体积,用U/ml来表示?由于第一次做,不是很明白,也是刚接触这方面的实验,所以大家指教一下!!!
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

补充一下,虽然有试剂盒,但是还是不太明白~写的有点复杂~~
2楼2013-07-06 11:01:12
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-07-06 12:05:48
czcpudai: 金币+2, 有帮助 2013-07-07 16:26:21
你可以现在6孔板里加药养细胞,平行加药多养点,最后再收细胞,总体加裂解液  
Domyallbesttohaveahappylife.
3楼2013-07-06 11:05:15
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-07-06 11:05:15
你可以现在6孔板里加药养细胞,平行加药多养点,最后再收细胞,总体加裂解液  

好的,谢谢~ 那你得意思是获得的细胞匀浆是用裂解液获得?你做过用超声获得是不是可以?还有,最后酶活力的单位是以体积来衡量,还是以总蛋白的量来衡量~~~
4楼2013-07-07 16:27:52
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

总蛋白吧 体积不准
Domyallbesttohaveahappylife.
5楼2013-07-07 16:35:01
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-07-07 16:35:01
总蛋白吧 体积不准

同意,你说的有道理~
6楼2013-07-09 18:40:12
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jinmingpeng

新虫 (初入文坛)

大神,你的问题解决了吗?我现在有类似的疑问
裂解细胞可以用RIPA裂解液吗?细胞数量太少会会测不出来酶活性吗?我可以用同一种裂解上清测这四个值吗?时间有差别会不会有影响啊?
谢谢大神
7楼2016-03-01 21:17:27
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jiaoqin1

新虫 (初入文坛)

楼主做出来了吗,今天做了一天结果都没有差异,细胞密度有一百万啊
8楼2017-05-24 18:05:09
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大魔王Boys

铁虫 (初入文坛)

请问一下你用的哪家的试剂盒?总蛋白的量怎么测?
9楼2018-11-12 20:39:34
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