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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 贴壁细胞中SOD，GPX，CAT，MDA活力的测定
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 贴壁细胞中SOD，GPX，CAT，MDA活力的测定

请问一下各位，贴壁细胞中SOD，GPX，CAT，MDA活力是如何测定的？首先，裂解细胞的时候，大家用的是超声吗？超声的具体条件能讲解一下吗？由于我们实验室的变幅杆是破细菌用的，没有小号的，我打算用RIPA裂解液裂解细胞离心取上清做。由于我们用的药物量比较少，所以我只能用6孔板接种细胞，后再给药。但是这样子一个孔也只是加入150ul的裂解液。150ul的裂解液所得的细胞上清的量能够用于SOD，GPX，CAT，MDA这四种指标的检测吗？还有SOD，GPX，CAT最终浓度的单位是依据细胞总蛋白量，用U/毫克蛋白表示吗？还是依据上清体积，用U/ml来表示？由于第一次做，不是很明白，也是刚接触这方面的实验，所以大家指教一下！！！
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1楼 2013-07-06 10:57:34
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
补充一下，虽然有试剂盒，但是还是不太明白~写的有点复杂~~
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2楼2013-07-06 11:01:12
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-07-06 12:05:48
czcpudai: 金币+2, ★有帮助 2013-07-07 16:26:21
你可以现在6孔板里加药养细胞，平行加药多养点，最后再收细胞，总体加裂解液  
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Domyallbesttohaveahappylife.
3楼2013-07-06 11:05:15
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-07-06 11:05:15
你可以现在6孔板里加药养细胞，平行加药多养点，最后再收细胞，总体加裂解液  

好的，谢谢~ 那你得意思是获得的细胞匀浆是用裂解液获得？你做过用超声获得是不是可以？还有，最后酶活力的单位是以体积来衡量，还是以总蛋白的量来衡量~~~
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4楼2013-07-07 16:27:52
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主
总蛋白吧 体积不准
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Domyallbesttohaveahappylife.
5楼2013-07-07 16:35:01
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-07-07 16:35:01
总蛋白吧 体积不准

同意，你说的有道理~
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6楼2013-07-09 18:40:12
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jinmingpeng

新虫 (初入文坛)
大神，你的问题解决了吗？我现在有类似的疑问
裂解细胞可以用RIPA裂解液吗？细胞数量太少会会测不出来酶活性吗？我可以用同一种裂解上清测这四个值吗？时间有差别会不会有影响啊？
谢谢大神
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7楼2016-03-01 21:17:27
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jiaoqin1

新虫 (初入文坛)
楼主做出来了吗，今天做了一天结果都没有差异，细胞密度有一百万啊
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8楼2017-05-24 18:05:09
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大魔王Boys

铁虫 (初入文坛)
请问一下你用的哪家的试剂盒？总蛋白的量怎么测？
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9楼2018-11-12 20:39:34
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