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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 蛋白质银染问题求助 已有2人参与

固定后，醇洗、水洗、硫代硫酸钠敏化、水洗、硝酸银染、水洗、甲醛-碳酸钠溶液显色、乙酸终止。
最左边是marker，灰色泳道没有加样。
背景色深，中间蛋白质样品（蛋白质成分相对单一）没有明显的条带，有亮带和暗带。染色需怎样改进？亮带和暗带是怎么回事？不知道怎么看银染的结果
蛋白质银染问题求助
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1楼 2013-12-27 14:36:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 20:59:53
引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-28 11:15:28
最右边是IP后的磁珠变性后溶液。大分子量部分有亮带。...

我觉得是硝酸银的问题，通常情况下不会是这种亮色，应该是棕色和暗棕色。有些疏水蛋白是黑色的。最左边的marker染色还算是可以的。如果背景深可能是水不干净，要用mili-Q水配置各种溶液，染胶的容器也要干净。
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6楼2013-12-28 13:23:23
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jurkat.1640: 金币+1, ★有帮助 2013-12-27 15:51:03
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 新年快乐。 2013-12-27 17:06:32
jurkat.1640: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-28 16:28:52
jurkat.1640: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-14 09:51:10
蛋白上样量是否合适？水洗时间不要太长了，15"洗三次。除了固定液和乙醇以外，溶液要当天新鲜配制。
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2楼2013-12-27 15:10:02
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-27 15:10:02
蛋白上样量是否合适？水洗时间不要太长了，15"洗三次。除了固定液和乙醇以外，溶液要当天新鲜配制。

洗的时间不长，第一次做所以都是新配的。
为什么上面的带是白色（貌似蛋白比较多），下面的是黑色带？
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3楼2013-12-27 15:50:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-27 15:50:34
洗的时间不长，第一次做所以都是新配的。
为什么上面的带是白色（貌似蛋白比较多），下面的是黑色带？...

你指什么带白色黑色？还有忘记问你右边的泳道是什么样品？
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4楼2013-12-27 16:19:03
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