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djf0911ok

金虫 (正式写手)

[求助] 求助蛋白质吸附问题

我想知到牛血清白蛋白(BSA)能与什么蛋白质或抗体吸附,吸附方式是什么?
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专心搞kuoyan
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
djf0911ok: 金币+2, 有帮助 2012-10-29 15:12:05
silicare: 金币+2 2012-10-31 18:59:57
BSA不吸附什么蛋白,它本身就是一种蛋白。抗体的话当然是能和抗BSA的特异抗体结合。不明白你问这个是什么意思。做Western时BSA可以用于封闭膜上非特异结合位点,也加在抗体溶液中作为一抗和二抗的保护剂。
2楼2012-10-29 11:15:07
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励新虫发帖! 2012-10-29 13:25:32
djf0911ok: 金币+2 2012-10-29 15:12:12
理论上讲是不会有特异性吸附的,有吸附也是非特异性的,其作用的方式应该是蛋白表面的正负电性或是基团等
但有一种情况是有特异性吸附的,那就是BSA免疫得到的抗体
3楼2012-10-29 11:53:17
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djf0911ok

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-29 11:15:07
BSA不吸附什么蛋白,它本身就是一种蛋白。抗体的话当然是能和抗BSA的特异抗体结合。不明白你问这个是什么意思。做Western时BSA可以用于封闭膜上非特异结合位点,也加在抗体溶液中作为一抗和二抗的保护剂。

这个我知道,我们想做一种检测蛋白质或抗体的生物传感器,用BSA做中间层,再接蛋白质(抗体),然后用来检测对应的抗体(蛋白质)。所以想看看有什么蛋白质或抗体可以与BSA结合,静电吸附或其他方法相结合都没问题。
专心搞kuoyan
4楼2012-10-29 15:11:29
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djf0911ok

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yongbo_liang at 2012-10-29 11:53:17
理论上讲是不会有特异性吸附的,有吸附也是非特异性的,其作用的方式应该是蛋白表面的正负电性或是基团等
但有一种情况是有特异性吸附的,那就是BSA免疫得到的抗体

这个我知道,我们想做一种检测蛋白质或抗体的生物传感器,用BSA做中间层,再接蛋白质(抗体),然后用来检测对应的抗体(蛋白质)。所以想看看有什么蛋白质或抗体可以与BSA结合,静电吸附或其他方法相结合都没问题。
专心搞kuoyan
5楼2012-10-29 15:12:25
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
djf0911ok: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-10-31 10:50:15
是这样啊!
对于非特异性吸附的话,我感觉不会有什么成熟的例子,即使有,应该不是特异性的,对你的实验结果没支持性。
但如果用BSA偶联的方法,还是比较好办的(如EDC/NHS等)
可以利用BSA上面的氨基或羧基,同时还要看你的蛋白或抗体的特异(不能影响其活性位点)
6楼2012-10-29 16:06:20
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djf0911ok

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yongbo_liang at 2012-10-29 16:06:20
是这样啊!
对于非特异性吸附的话,我感觉不会有什么成熟的例子,即使有,应该不是特异性的,对你的实验结果没支持性。
但如果用BSA偶联的方法,还是比较好办的(如EDC/NHS等)
可以利用BSA上面的氨基或羧基,同 ...

能帮我推荐几种可以和BSA通过氨基或羧基结合的蛋白质么,不懂这方面的内容。
专心搞kuoyan
7楼2012-10-31 10:51:23
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silicare

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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djf0911ok: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-02 09:09:56
BSA本身就是血液中的一种稳定蛋白质,能和它发生吸附的理论上有,但实际上你可能找不到,因为这种靠蛋白表明的局部氢键等化合键来吸附,力量实在太小了。既然你的实验可以用抗体,那你就用单抗吧,BSA肯定不止一个抗原决定簇,多个单克隆抗体也就等于有多种蛋白和它发生作用,而且这些抗体之间还不会发生反应,你也可以根据自己的需要对抗体做荧光或酶等标记。

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8楼2012-10-31 19:04:40
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djf0911ok

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by silicare at 2012-10-31 19:04:40
BSA本身就是血液中的一种稳定蛋白质,能和它发生吸附的理论上有,但实际上你可能找不到,因为这种靠蛋白表明的局部氢键等化合键来吸附,力量实在太小了。既然你的实验可以用抗体,那你就用单抗吧,BSA肯定不止一个抗 ...

能不能帮我介绍下BSA的具体性质啊?
专心搞kuoyan
9楼2012-11-02 09:43:20
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