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刺芹侧耳铁杆木虫 (小有名气)
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DNS法测还原糖-----样品颜色与对照颜色差不多，什么原因 已有1人参与
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最近在做杏鲍菇栽培料中CMC酶活测定的实验，结果发现用DNS显色后，对照（酶已失活）和处理的颜色深浅差不多，有没有人遇到和我一样的情况？什么原因啊？ 具体过程如下： 粗酶液制备：取培养料10g，加蒸馏水100ml，4-6度浸提过夜，过滤后得上清液。 底物：CMC-Na，0.5% No. Ck-6 6-1 粗酶液（ml） 2 2 沸水煮10min 是 否 CMC-Na（ml） 3 3 40度保温30min，取出水浴15min，得酶液反应液 No. 0 1 2 3 4 5 Ck-6 6-1 葡萄糖标准溶液（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0.5 0.5 水（ml） 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.5 0.5 DNS（ml） 2 2 2 2 2 2 2 2 混匀水浴加热5min，取出冷却，定容至25ml，测吸光度 以上是我实验的整个过程，结果出来后，理论上应该是6-1的颜色要比Ck-6的颜色深，可是显色后，两个颜色机会一样，肉眼分辨不出来， 而且CK-6加DNS也显色了。。。。。 我分析有可能有以下原因：1、样品中的酶浓度的确很低；2、样品中本来就有其他别的和DNS反应后显色的物质，所以显色后对照和处理颜色差不多。 我想把酶液反应的时间延长一点，比如从30min延长到1h，2h，这样就可以加大显色后颜色的对比，不知道这样可行不？有没有谁也遇到和我一样的情况啊？谢谢！  右边是对照.jpg |
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2楼2014-03-02 17:32:09
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