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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western blot在加一抗之前最多封闭多久？
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神佑考研

金虫 (小有名气)

[求助] western blot在加一抗之前最多封闭多久？已有6人参与

近期在做western 的时候由于中间有事情耽误，所以在想要不要加长脱脂奶粉的封闭时间，故有此一问：western blot在加一抗之前最多封闭多久？我们实验室一般是一个小时，但是要是提高到2h或者4h会有什么后果呢？跪求师兄师姐们以及各位老师高手来解答………………………………………………
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I Claim your sun !
1楼2013-12-22 18:30:33
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
神佑考研(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-23 08:57:53
神佑考研: 金币+3, 那室温下封闭呢？要多久? 2013-12-23 18:17:54
封闭只是block掉膜上无蛋白区域的非特异结合位点，时间长点没关系。但时间太长会造成block试剂（奶粉或者BSA）的变性。4°C过夜是可以的，室温下最好不要过夜。
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7楼2013-12-23 06:55:11
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张力民1598

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-23 08:57:04
四度可以过夜的，我这么干过，没有影响。
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2楼2013-12-22 19:37:35
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探花花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-23 08:57:13
一抗是可以过夜的   但是二抗是不可以的  过夜没问题
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相信什么才会得到什么
3楼2013-12-22 20:56:20
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-23 08:57:22
没问题，实在不行4度放的时间会更久，还有就是可以把一抗孵育上，放4°，24-48h也可以！
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寻找真正的自我！
4楼2013-12-22 20:57:35
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