应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 求助，镍柱纯化蛋白，蛋白挂不上去
51/1返回列表
查看: 3761  |  回复: 17
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 求助，镍柱纯化蛋白，蛋白挂不上去已有8人参与

小弟最近在做酶的纯化，用的康为世纪的镍柱，结果蛋白吸附不上去，结果流经液里蛋白浓度高，而且酶活挺高，洗脱液里反而很少。平衡液咪挫浓度为10mmol/l，洗脱液咪挫浓度为500mmol/l。后来听朋友说平衡液咪挫浓度再低点，结合的力强点，咪挫调整到5mmol/l，貌似还是上述情况。望有经验的师兄师姐多指点指点
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-12-19 10:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你用无咪唑的buffer上样，有时标签结合力很弱
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-12-20 13:02:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以多设置几个洗脱浓度。
赞一下 回复此楼
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-12-19 13:14:41
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kunge1983

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-20 15:25:41
咪唑浓度这么低还上不去 建议重新设计载体 或者变复性吧 估计是组氨酸标签在蛋白内部了
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-12-20 05:48:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Allen206

银虫 (小有名气)
是原核表达的么？变形记处理一下看能不能挂柱？能的话就是空间结构的问题，换标签位置
赞一下 回复此楼
不想说什么，，，，
4楼2013-12-20 09:40:07
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭