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wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 求助,镍柱纯化蛋白,蛋白挂不上去已有8人参与

小弟最近在做酶的纯化,用的康为世纪的镍柱,结果蛋白吸附不上去,结果流经液里蛋白浓度高,而且酶活挺高,洗脱液里反而很少。平衡液咪挫浓度为10mmol/l,洗脱液咪挫浓度为500mmol/l。后来听朋友说平衡液咪挫浓度再低点,结合的力强点,咪挫调整到5mmol/l,貌似还是上述情况。望有经验的师兄师姐多指点指点
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b6122

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
冲洗用1mM的咪唑试试,用你平时的buffer量加倍冲洗

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2013-12-20 11:24:52
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