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蛋白的纯化复性
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如题，大肠杆菌发酵的重组蛋白，含有多个半胱氨酸。 提取包涵体，用盐酸胍溶解得溶液后稀释复性（通常是5倍）， 问题一：是将蛋白滴到稀释液中还是将稀释液滴到蛋白中，哪种方式好呢？ 将稀释好的溶液进行透析复性，一般是3到4次，稀释倍数是5倍、10倍、10倍、最后一次用20mM Tris。 将透析好的溶液上Q株，然后用高浓度的盐洗脱。 问题二：为什么OD280小于260的，且OD260/OD280的比值大于1.6，这个里面是不是含有大量的核酸呢？为什么包涵体电泳结果中，显示有该蛋白质呢？ 现在不知道这个实验该怎么进行下去才能得到我要的目的蛋白了，不知道哪位有很好的经验能够和我一起分析，谢谢 |
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4楼2018-08-06 13:04:30