应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 工艺技术 » 工艺设计 » 蛋白的纯化复性
41/1返回列表
查看: 1372  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sophia-yxh

铜虫 (正式写手)

[交流] 蛋白的纯化复性

如题，大肠杆菌发酵的重组蛋白，含有多个半胱氨酸。
提取包涵体，用盐酸胍溶解得溶液后稀释复性（通常是5倍），
问题一：是将蛋白滴到稀释液中还是将稀释液滴到蛋白中，哪种方式好呢？

将稀释好的溶液进行透析复性，一般是3到4次，稀释倍数是5倍、10倍、10倍、最后一次用20mM Tris。
将透析好的溶液上Q株，然后用高浓度的盐洗脱。

问题二：为什么OD280小于260的，且OD260/OD280的比值大于1.6，这个里面是不是含有大量的核酸呢？为什么包涵体电泳结果中，显示有该蛋白质呢？

现在不知道这个实验该怎么进行下去才能得到我要的目的蛋白了，不知道哪位有很好的经验能够和我一起分析，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-12-17 10:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diamond-snow

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
具体的变复性过程是怎样呢，我的蛋白也有4个半胱氨酸，不太好复性

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-08-06 13:04:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
sjmr12212楼
2013-12-17 10:28   回复  
whiteness3楼
2013-12-18 17:09   回复  
127
相关版块跳转 我要订阅楼主 sophia-yxh 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭