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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 工艺技术 » 工艺设计 » 蛋白的纯化复性
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sophia-yxh

铜虫 (正式写手)

[交流] 蛋白的纯化复性

如题，大肠杆菌发酵的重组蛋白，含有多个半胱氨酸。
提取包涵体，用盐酸胍溶解得溶液后稀释复性（通常是5倍），
问题一：是将蛋白滴到稀释液中还是将稀释液滴到蛋白中，哪种方式好呢？

将稀释好的溶液进行透析复性，一般是3到4次，稀释倍数是5倍、10倍、10倍、最后一次用20mM Tris。
将透析好的溶液上Q株，然后用高浓度的盐洗脱。

问题二：为什么OD280小于260的，且OD260/OD280的比值大于1.6，这个里面是不是含有大量的核酸呢？为什么包涵体电泳结果中，显示有该蛋白质呢？

现在不知道这个实验该怎么进行下去才能得到我要的目的蛋白了，不知道哪位有很好的经验能够和我一起分析，谢谢
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1楼 2013-12-17 10:03:30
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diamond-snow

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
具体的变复性过程是怎样呢，我的蛋白也有4个半胱氨酸，不太好复性

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4楼2018-08-06 13:04:30
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sjmr12212楼
2013-12-17 10:28   回复  
whiteness3楼
2013-12-18 17:09   回复  
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