应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取结果分析
111/2返回列表12下一页
查看: 2153  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

张小逸

铜虫 (小有名气)

[求助] RNA提取结果分析 已有7人参与

提取了动物组织的RNA，28S和18S的条带很清晰，28比18也亮，并且无5S条带。但是在28S与点样孔之间有较亮条带，是否为DNA或蛋白污染？此RNA能否用于反转录，或继续下游PCR实验？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-15 11:38:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有时候没有5S是因为跑胶过长，EB往反方向跑，染色弱导致，一或电泳上样量不足

28S与点样孔之间有较亮条带，是genomic DNA的污染，最好先消化掉DNA，再进行后续的逆转录和PCR实验
赞一下(2人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2013-12-15 23:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 20:02:22
可能是蛋白质，多糖或者dna染料太多都会造成加样孔亮
赞一下(1人) 回复此楼
但愿人长久
10楼2013-12-17 08:36:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-15 15:44:32
发个图片上来比较好。不管电泳时是否看得见gDNA，做反转录前都需要用DNase消化RNA。
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-15 13:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-15 15:44:40
用什么方法提的？
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-15 14:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
5S带可能降解了
回复此楼
世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
4楼2013-12-15 20:14:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xv1215

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能不能用于下面的实验还是测一下od值比较保险，1.8-2.0左右基本可用

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2013-12-16 08:21:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加样空量亮是蛋白污染，RNA提取的好与坏，除了胶图还要看260、280、230的比值。
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-16 08:46:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小逸

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-15 13:08:41
发个图片上来比较好。不管电泳时是否看得见gDNA，做反转录前都需要用DNase消化RNA。

我用的Takara的 PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time)试剂盒，里面的gDNA Eraser和5×gDNA Eraser Buffer反应42度2分钟，是不是就能很好的去除gDNA？
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-16 10:18:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 张小逸 at 2013-12-16 10:18:27
我用的Takara的 PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time)试剂盒，里面的gDNA Eraser和5×gDNA Eraser Buffer反应42度2分钟，是不是就能很好的去除gDNA？...

没用过这个kit，不知道效果如何。gDNA是否完全消化干净要自己检测。
赞一下 回复此楼
9楼2013-12-16 16:28:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张小逸 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +20 koalala 2026-08-24 22/1100 2026-08-24 18:01 by Nano-Firefly
[基金申请] 人气不行了 +9 fansofjerry 2026-08-21 9/450 2026-08-24 17:48 by zhaozhengxin
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +6 图啦图啦 2026-08-24 6/300 2026-08-24 17:44 by 小小红帆
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +5 scalable 2026-08-24 5/250 2026-08-24 17:03 by spiderzhuzhi
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭