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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 胶体金试纸条控制线不出条带？
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pangxinyi

新虫 (小有名气)

[求助] 胶体金试纸条控制线不出条带？ 已有3人参与

我是做胶体金免疫试纸条的新手，试纸条是自己组装的，控制线点了二抗，羊抗鼠IgG，浓度为0.5-1mg/ml,每条点了1微升，连接垫上的金标抗体也是1微升, 用水跑试纸条，控制线都没有出现条带，是哪里出了问题啊？？求解惑
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1楼 2013-12-02 15:13:06
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richujs

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
金标条件是多少？重悬后浓缩了几倍？可能是金标用少了

抗体标记的ph优化好了？
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思想是能力和力量的源泉
2楼2013-12-02 21:24:20
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pangxinyi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by richujs at 2013-12-02 21:24:20
金标条件是多少？重悬后浓缩了几倍？可能是金标用少了

抗体标记的ph优化好了？

1ML胶体金加入5微升抗体，再加封闭液，重悬后还需要浓缩啊？我就是在加入复溶液后直接点膜的，浓缩多少倍啊？我也怀疑是金标少，PH没有优化，只优化了最佳抗体结合量，胶体金PH影响会很大吗？？
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3楼2013-12-03 18:04:15
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richujs

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pangxinyi at 2013-12-03 18:04:15
1ML胶体金加入5微升抗体，再加封闭液，重悬后还需要浓缩啊？我就是在加入复溶液后直接点膜的，浓缩多少倍啊？我也怀疑是金标少，PH没有优化，只优化了最佳抗体结合量，胶体金PH影响会很大吗？？...

一般浓缩5～10倍后，再倍比稀释看显色。pH影响灵敏度
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思想是能力和力量的源泉
4楼2013-12-03 18:57:57
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pangxinyi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by richujs at 2013-12-03 18:57:57
一般浓缩5～10倍后，再倍比稀释看显色。pH影响灵敏度...

请问怎样操作啊？浓缩后再稀释？还是有点没懂啊，能都指点一下啊，谢谢！！
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5楼2013-12-04 09:13:27
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mengjiangnan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
buffer有问题，用pbs试试
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6楼2013-12-04 11:52:08
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pangxinyi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mengjiangnan at 2013-12-04 11:52:08
buffer有问题，用pbs试试

我用的自己配的试纸条缓冲液TBS(Tris, Nacl)可不可以呢？
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7楼2013-12-04 14:40:12
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mengjiangnan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by pangxinyi at 2013-12-04 14:40:12
我用的自己配的试纸条缓冲液TBS(Tris, Nacl)可不可以呢？...

tris-Hcl 效果不太好
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8楼2013-12-05 03:01:07
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Anmy99

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我的是1ML胶体金加了抗体后封闭，离心，再0.1ML重悬，相当于10倍浓缩了。之后再稀释，至于稀释的倍数就看显色强度来决定了。
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9楼2014-02-28 16:15:45
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Anmy99

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PH影响很大的，PH会影响金子与抗体的结合程度，过酸过碱都会死金，结果就做不出来了。
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10楼2014-02-28 16:18:03
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