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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量Ct值

请问下做半定量内参基因条带正常,目的基因表达量很低条带很弱。再拿去做荧光定量内参的Ct值是23也正常,但是目的基因Ct值是15,按道理这种情况目的基因Ct值不是应该较大吗? 还是因为表达量太小,导致仪器检测荧光有问题?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zds2257: 金币+2 2013-11-29 14:22:04
做荧光定量时目的基因扩增曲线是否正常,熔解曲线峰是否单一?
5楼2013-11-28 17:16:38
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查看全部 12 个回答

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zds2257: 金币+2 2013-11-28 16:51:40
zds2257: 金币+18, 3个重复 相对定量模板浓度没调 2013-11-28 16:53:56
我也觉着怪异啊,怎么CT值反而小了,做了几个重复啊,模板一样多吗
2楼2013-11-28 13:00:47
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zds2257: 金币+2 2013-11-28 16:58:52
拿荧光PCR产物跑个电泳看看长度对不对。看熔解曲线的Tm值是否异常。是不是引物二聚体或非特异扩增?
3楼2013-11-28 14:09:04
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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-11-28 14:09:04
拿荧光PCR产物跑个电泳看看长度对不对。看熔解曲线的Tm值是否异常。是不是引物二聚体或非特异扩增?

普通PCR跑的半定量  条带单一没有其他杂带  荧光PCR产物跑完都不管了
4楼2013-11-28 16:57:22
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