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llypkl

新虫 (小有名气)

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[求助] 转化子长不出来

Sample Text
目的基因片段大小300bp,载体为pSK改造而成，大约4000bp，昨天做了连接转化，转化子一个都没有长出来，求各路人的帮助，是什么原因

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1楼 2013-11-21 09:27:09

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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

专家经验: +24
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管辖: 分子生物

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-21 13:00:24

你的问题问的太泛，你至少应该描述下你的实验过程，根据分析你的实验过程，才好帮你分析长不出来的原因

比如说，你的目的基因是如何获得的，什么酶做的酶切，什么酶做的连接，连接条件是什么？等等，这样才好分析

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com

2楼2013-11-21 12:40:49

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

克隆不成功80%的原因是酶切不好。酶用量是否合适，酶切是否完全？连接体系如何建立的，连接转化有做正对照吗？

3楼2013-11-21 13:45:38

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