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llypkl

新虫 (小有名气)

[求助] 转化子长不出来

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目的基因片段大小300bp,载体为pSK改造而成,大约4000bp,昨天做了连接转化,转化子一个都没有长出来,求各路人的帮助,是什么原因
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-21 13:00:24
你的问题问的太泛,你至少应该描述下你的实验过程,根据分析你的实验过程,才好帮你分析长不出来的原因

比如说,你的目的基因是如何获得的 ,什么酶做的酶切,什么酶做的连接,连接条件是什么?等等,这样才好分析
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-21 12:40:49
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
克隆不成功80%的原因是酶切不好。酶用量是否合适,酶切是否完全?连接体系如何建立的,连接转化有做正对照吗?
3楼2013-11-21 13:45:38
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