应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 用试剂盒提土壤总DNA，PCR后仍无条带，求原因及解决方法
101/1返回列表
查看: 2169  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

张玉洁想下载

木虫 (初入文坛)

[求助] 用试剂盒提土壤总DNA，PCR后仍无条带，求原因及解决方法

我是用试剂盒FAST DNATM SPIN Kit for Soil提土壤DNA的，严格按照实验步骤操作，然后提出来的进行16S扩增，但是电泳后没有条带，我的实验土壤是添加生物炭的，由于第一次做分子实验，老是没有结果，很是着急，求给位大神支支招，谢谢……
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
天行健，君子以自强不息~
1楼 2013-11-18 11:35:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
do u have a posoitive control?
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-18 12:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张玉洁想下载

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zh10246 at 2013-11-18 12:10:16
do u have a posoitive control?

完全是按照试剂盒步骤来的，我的实验土壤一直是放在零下20度保存的，是一个实验系列的，现在十个土样都没有结果，很着急很着急……
赞一下 回复此楼
天行健，君子以自强不息~
3楼2013-11-18 15:55:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梧桐柒夕

主管区长 (文坛精英)

优秀区长优秀区长优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分子实验说简单也简单，说复杂也复杂。毫不夸张地说，其中的操作对实验是有很重要的作用，不怕费钱的话先多做几次练手吧。一般成品的试剂盒都是试过很多次才上市的。祝好运。
赞一下 回复此楼
轻描淡写，浓墨重彩。
4楼2013-11-18 18:43:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抹香鲸

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1 提取的总DNA测浓度了吗？结果怎样？泡胶了吗？ 条带何如？
2 扩增mixture里，加BSA了吗？
赞一下 回复此楼
everything will flow
5楼2013-11-19 20:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张玉洁想下载

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 梧桐柒夕 at 2013-11-18 18:43:23
分子实验说简单也简单，说复杂也复杂。毫不夸张地说，其中的操作对实验是有很重要的作用，不怕费钱的话先多做几次练手吧。一般成品的试剂盒都是试过很多次才上市的。祝好运。

就是因为怕费钱，每一步都很小心的在做，结果没有试验结果，应该不是操作问题，因为师姐做的也没有条带……
赞一下 回复此楼
天行健，君子以自强不息~
6楼2013-11-21 20:30:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张玉洁想下载

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 抹香鲸 at 2013-11-19 20:07:01
1 提取的总DNA测浓度了吗？结果怎样？泡胶了吗？ 条带何如？
2 扩增mixture里，加BSA了吗？

没有测浓度，总DNA没有条带，就16S rRNA全长扩增了，结果还是没有条带，因为是全长扩增，没有加BSA……
赞一下 回复此楼
天行健，君子以自强不息~
7楼2013-11-21 20:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梧桐柒夕

主管区长 (文坛精英)

优秀区长优秀区长优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张玉洁想下载 at 2013-11-21 20:30:09
就是因为怕费钱，每一步都很小心的在做，结果没有试验结果，应该不是操作问题，因为师姐做的也没有条带……...

这个就不好说了，我看师兄今天也没有条带，就重做了。多试试吧。
赞一下 回复此楼
轻描淡写，浓墨重彩。
8楼2013-11-21 20:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抹香鲸

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 张玉洁想下载 at 2013-11-21 20:31:41
没有测浓度，总DNA没有条带，就16S rRNA全长扩增了，结果还是没有条带，因为是全长扩增，没有加BSA……...

加点儿BSA，土壤里面有些成分是taq酶抑制剂。
赞一下 回复此楼
everything will flow
9楼2013-11-22 04:21:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Love蕾醒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 抹香鲸 at 2013-11-19 20:07:01
1 提取的总DNA测浓度了吗？结果怎样？泡胶了吗？ 条带何如？
2 扩增mixture里，加BSA了吗？

请问一下BSA浓度和添加量是多少？感谢！
赞一下 回复此楼
10楼2019-09-19 11:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张玉洁想下载 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:22 by o3EMxHUAQDtS
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:12 by o3EMxHUAQDtS
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭