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yabing0324

金虫 (职业作家)

[交流] 用土壤DNA提取试剂盒提出的浓度有多大 已有6人参与

我用mobio试剂盒提的,浓度很低,才10ng/μl,电泳有条带,最后是用100μl洗脱液溶的,大家谁用过这个试剂盒,你们提出来是多少,谢谢!
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yangjie86

金虫 (正式写手)

★ ★
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silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-11-17 12:03:44
好巧,我也是植保病理方向的。你土壤加了多少g?我试过一个试剂盒菌量不大的条件下0.2g土壤提了29ng/ul,但还没有手提的浓度大。对了这个试剂盒是我一直想买的,楼主在那个公司买的,多少钱?
莫回头看背后的身影。
2楼2011-09-27 18:39:46
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yangjie86

金虫 (正式写手)

100ul洗脱液太多,加少点,重复洗几次试试。
莫回头看背后的身影。
3楼2011-09-27 18:41:00
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yabing0324

金虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yangjie86 at 2011-09-27 18:41:00:
100ul洗脱液太多,加少点,重复洗几次试试。

是,加的洗脱液太多了,土也是0.2个,我用的是试用装,这个试剂盒买的话还要用公司配套的一个涡旋仪,下来大概共1w吧。

原来你的浓度也不太大,比着手提的我这个浓度小了十倍,唉~!

你主要是分析土壤生物多样性吗?我主要想要土壤中某种真菌的DNA.请问你知道有什么试剂盒提土壤真菌效果好点吗?或者其他手提的方法也可以。
4楼2011-09-28 16:44:58
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匿名

用户注销 (初入文坛)

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silicare(金币+2): 鼓励新虫发帖奖励 2011-11-17 12:04:07
本帖仅楼主可见
5楼2011-10-18 14:57:09
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yabing0324

金虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lilylee61 at 2011-10-18 14:57:09:
土壤DNA提取试剂盒效果不好,还是用一些文献中所采用的SDS提取法什么的比较好。
我用SDS改良法提的浓度100-1000ng/ul
[ Last edited by lilylee61 on 2011-10-18 at 16:24 ]

是啊,试剂盒量太少
那你是怎么纯化的?
6楼2011-10-19 13:06:14
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tapmun

木虫 (著名写手)

★ ★
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silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-11-17 12:04:19
引用回帖:
5楼: Originally posted by lilylee61 at 2011-10-18 14:57:09:
土壤DNA提取试剂盒效果不好,还是用一些文献中所采用的SDS提取法什么的比较好。
我用SDS改良法提的浓度100-1000ng/ul
[ Last edited by lilylee61 on 2011-10-18 at 16:24 ]

我也是用SDS改良法提取的,但是提取后,我的样品是棕色的,离心柱试剂盒纯化之后,PCR不出来。
业精于勤荒于嬉,行成于思而毁于随
7楼2011-11-16 21:08:12
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tapmun

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
现在考虑购买试剂盒,但是试剂盒提取的量又太少,尽管可以直接用于PCR,担心有些微生物的DNA提取不到,我是把已知菌加进土壤
业精于勤荒于嬉,行成于思而毁于随
8楼2011-11-16 21:12:08
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leaf91626

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我困惑啊,土壤DNA真得很难提,提取了之后很容易降解掉,PCR老不出来
9楼2012-02-27 14:24:21
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小果冻524

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也用的这个试用装,没有必要买漩涡仪和适配器吧?我只是用漩涡仪震荡也不错啊,提出来30ng,确实比较少,但是质量好啊,做PCR加多点没问题
10楼2012-07-23 17:31:25
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