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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » HPLC基线上漂
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落月无华0810

铁虫 (小有名气)

[求助] HPLC基线上漂

各位大神，为什么走空白针基线会漂呢？在50min左右漂成这样！！！梯度洗脱，梯度如下图。走样品时候也在这个位置漂，初步可以排除残留成分干扰，会是什么原因呢？
HPLC基线上漂
捕.PNG


HPLC基线上漂-1
捕获.PNG
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bemyself！！！
1楼 2013-10-31 08:00:36
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wormlong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
落月无华0810(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2013-10-31 13:56:33
你走液相时有没有记录压力曲线，如果有的话可以查看一下走样时有没有压力的波动或者有可能是流路的污染引起，都可以尝试通过冲洗流路解决一下
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3楼2013-10-31 08:39:38
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
落月无华0810(zhychen2008代发): 金币+2, 多谢回帖交流 2013-10-31 13:56:13
你用的agilent的吧。我以前遇到同样的问题。这应该是高压梯度泵从渐变梯度转为恒流时需要平衡时间，而这个时间长短跟盐的浓度和比例有关且该时间具有滞后性。我最终是变换了梯度程序，让这个干扰峰处在了不干扰测定的位置，你也可以试试看看。
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
2楼2013-10-31 08:37:02
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linglingF8

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhychen2008: 金币+2, 多谢回帖交流 2013-10-31 13:57:17
1.如果是在开发分析方法，这个位置只要保证不干扰你检测就可以（杂质的出峰位置不在此处就可以）。但是有机会的话还是要调整一下比较好，建议将有机相比例降低就会好很多，但是如果杂质冲不出来可以延长洗脱时间，如果想减少分析时间，改个柱长及填料的粒径，保证非常高的柱效及分离度就好。
2.如果是参照标准，可能是单位的水质有问题，再有就是你用的缓冲盐级别低，我想有机相应该都是色谱级（最好是默克的），如果以上均不可以，那原图上应该也是这样。
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作有责任的制药人
4楼2013-10-31 09:12:19
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
落月无华0810(zhychen2008代发): 金币+2, 多谢回帖交流 2013-10-31 13:57:34
1、如果光是以前不漂，现在漂。而现在又是可重复的话。有可能是试剂问题，查查以前用的试剂和现在的试剂是不是一样。级别，供应商，批号等等。用以前的再试试。
2、现在漂的情况是不可重复的，每针不一样。那可能的情况就比较多了，比如需要看看泵压的稳定性，柱温箱的稳定性及准确性，等等。逐个原因进行排查。
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落月无华0810
哥泡的不是论坛,是寂寞....
5楼2013-10-31 13:51:54
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