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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 【求助】HPLC基线上漂
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yusi5286

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC基线上漂

各位好
向大家请教一个问题， HPLC中基线向上漂移的原因有哪些？
我做的是有关物质降解实验
流动相A：0.05%三氟乙酸：乙腈（v：v）=60:40
流动相B：0.05%三氟乙酸：乙腈（v：v）=20:80
方法是：0-30min：100%A;
             31-55min：A:100%-0%,  B:0%-100%；  
             56-60min：100%A;
之前做的时候没有出现这个问题  也就隔了一个月吧 重新再做的时候 这个问题就一直有
柱子已试着换过  流动相也换过  可问题仍然存在
请大家针对我的问题提出见解，并给出相应的解决方案   谢谢！
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1楼 2010-10-18 22:13:19
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子君

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
kidant(金币-3):坐沙发收水费 2010-10-19 09:33:01
楼主是
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2楼2010-10-18 22:36:18
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yusi5286

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 子君 at 2010-10-18 22:36:18:
楼主是

不好意思  你想问什么呢？
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3楼2010-10-18 22:41:15
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jack_dany

金虫 (小有名气)
★
warlen(金币+1):谢谢参与 2010-10-19 09:21:21
yusi5286(金币+1): 2010-10-19 22:21:13
直接用100%的水相有影响吧，尽量加少量的有机相试试，从98%开始，平衡时间在30分左右。
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4楼2010-10-18 22:45:04
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huangq816

金虫 (正式写手)
★
warlen(金币+1):谢谢参与 2010-10-19 09:21:32
yusi5286(金币+1): 2010-10-19 22:21:27
3楼的分析有误，楼主的100%A不是纯水，而是流动相A：0.05%三氟乙酸：乙腈（v：v）=60:40
赞一下(1人) 回复此楼
人生就像一场马拉松，跑的最快的未必是笑到最后的！
5楼2010-10-19 08:05:36
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gyh_0919

铜虫 (初入文坛)
★
warlen(金币+1):谢谢参与 2010-10-19 09:21:43
yusi5286(金币+1): 2010-10-19 22:22:49
楼主的柱子前面有预柱么，如果有的话，可能是预柱脏了吧
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6楼2010-10-19 08:32:33
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yhluyao

金虫 (著名写手)
★
kidant(金币+1):谢谢回帖交流 2010-10-19 09:33:14
yusi5286(金币+1):谢谢 2010-10-20 18:27:31
那流动相冲  看看怎么样
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7楼2010-10-19 08:34:39
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zghnlpf

木虫 (正式写手)
★ ★
warlen(金币+2):谢谢参与 2010-10-19 11:48:00
yusi5286(金币+3): 2010-10-19 22:25:05
走梯度，基线漂移是很正常的是。怪就怪在楼主的现象不重复。以前不漂，现在漂，这就不对了。
回答问题前先问一下，现在的漂移，是可重复的吗？每针都这样？
1、如果光是以前不漂，现在漂。而现在又是可重复的话。有可能是试剂问题，查查以前用的试剂和现在的试剂是不是一样。级别，供应商，批号等等。用以前的再试试。
2、现在漂的情况是不可重复的，每针不一样。那可能的情况就比较多了，比如需要看看泵压的稳定性，柱温箱的稳定性及准确性，等等。逐个原因进行排查。
赞一下(2人) 回复此楼
啊，嗷，哦，嗯
8楼2010-10-19 09:48:09
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cxyzjy

禁虫 (著名写手)
yusi5286(金币+1): 2010-10-19 22:25:39
本帖内容被屏蔽
9楼2010-10-19 13:07:34
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cxyzjy

禁虫 (著名写手)
★
warlen(金币+1):谢谢参与 2010-10-19 15:46:11
yusi5286(金币+2): 2010-10-19 22:25:48
本帖内容被屏蔽
10楼2010-10-19 13:09:56
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