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yusi5286

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC基线上漂

各位好
向大家请教一个问题, HPLC中基线向上漂移的原因有哪些?
我做的是有关物质降解实验
流动相A:0.05%三氟乙酸:乙腈(v:v)=60:40
流动相B:0.05%三氟乙酸:乙腈(v:v)=20:80
方法是:0-30min:100%A;
             31-55min:A:100%-0%,  B:0%-100%;  
             56-60min:100%A;
之前做的时候没有出现这个问题  也就隔了一个月吧 重新再做的时候 这个问题就一直有
柱子已试着换过  流动相也换过  可问题仍然存在
请大家针对我的问题提出见解,并给出相应的解决方案   谢谢!
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zghnlpf

木虫 (正式写手)

★ ★
warlen(金币+2):谢谢参与 2010-10-19 11:48:00
yusi5286(金币+3): 2010-10-19 22:25:05
走梯度,基线漂移是很正常的是。怪就怪在楼主的现象不重复。以前不漂,现在漂,这就不对了。
回答问题前先问一下,现在的漂移,是可重复的吗?每针都这样?
1、如果光是以前不漂,现在漂。而现在又是可重复的话。有可能是试剂问题,查查以前用的试剂和现在的试剂是不是一样。级别,供应商,批号等等。用以前的再试试。
2、现在漂的情况是不可重复的,每针不一样。那可能的情况就比较多了,比如需要看看泵压的稳定性,柱温箱的稳定性及准确性,等等。逐个原因进行排查。
啊,嗷,哦,嗯
8楼2010-10-19 09:48:09
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子君

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
kidant(金币-3):坐沙发收水费 2010-10-19 09:33:01
楼主是
2楼2010-10-18 22:36:18
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yusi5286

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 子君 at 2010-10-18 22:36:18:
楼主是

不好意思  你想问什么呢?
3楼2010-10-18 22:41:15
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jack_dany

金虫 (小有名气)

★
warlen(金币+1):谢谢参与 2010-10-19 09:21:21
yusi5286(金币+1): 2010-10-19 22:21:13
直接用100%的水相有影响吧,尽量加少量的有机相试试,从98%开始,平衡时间在30分左右。
4楼2010-10-18 22:45:04
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