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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » Agilent HPLC 1200 的基线问题
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caodetiankun

铁虫 (初入文坛)

[交流] Agilent HPLC 1200 的基线问题

Sample Text
我用Agilent HPLC1200，4.6*250mm SB-C18柱分离抗氧剂时，用磷酸水溶液/乙腈做流动相时，为什么基线呈波浪状？冲了很久都那样！然后换成乙腈/水或甲醇/水做流动相，基线又正常了。为什么呢？
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1楼 2012-03-17 22:07:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主是用比例阀混合的溶剂还是混合好再用一个泵走的基线啊 可以先把两种流动相按比例混合 再用单泵来走一下呢 可能会使基线平一点
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6楼2012-03-19 19:05:16
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wfjbioon

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2012-03-19 19:05:16:
楼主是用比例阀混合的溶剂还是混合好再用一个泵走的基线啊 可以先把两种流动相按比例混合 再用单泵来走一下呢 可能会使基线平一点

采用这种方法一般能解决问题。同时也可以再超声处理下。
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7楼2012-03-19 19:23:30
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hlxydd

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
兄弟，0.1M的浓度就是100mM浓度非常高了，如果是磷酸盐，这个浓度肯定基线不稳的，没必要搞这么高浓度，还有波长一般210这种低波长才会基线不稳，如果254nm是没有问题的。你的问题我分析了下：
1.可能是没有在线脱气机，气泡产生。
2.如果流动相都超声脱气，那就是浓度问题，100mm的浓度太高，必须降低。
3.混合器质量不好，换成等度看看。
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16楼2012-03-26 12:20:10
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普通回帖

yuh870519

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会不会是磷酸盐的浓度太大了？
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2楼2012-03-18 23:51:46
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yuh870519

新虫 (初入文坛)
★
soundhorizo: 金币+1, 鼓励应助，欢迎常来分析版指导交流 ^^ 2012-03-19 08:55:12
跟检测波长也有关系。
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3楼2012-03-18 23:56:20
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gwwgww5566

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我做液质如果出现规律的波浪状基线一般是泵里有气泡，你这液相换了流动相后波浪状消失说明应该不是仪器的问题，还是流动相的问题。可以调节一下浓度，冲的时间长点，要是一直是规律的波浪状基线也可认为是稳定状态
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4楼2012-03-19 13:05:56
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主用纯水相过渡了吗，检测波长是不是太低了？
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caodetiankun
5楼2012-03-19 18:59:31
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MJF628

金虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多大的波浪，开空调了么
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8楼2012-03-19 21:28:59
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caodetiankun

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuh870519 at 2012-03-18 23:51:46:
会不会是磷酸盐的浓度太大了？

才0.1M
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9楼2012-03-20 20:36:13
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caodetiankun

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuh870519 at 2012-03-18 23:56:20:
跟检测波长也有关系。

但那是检测物的最大吸收波长，必须在那个波长下检测
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10楼2012-03-20 20:37:30
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caodetiankun

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2012-03-19 18:59:31:
楼主用纯水相过渡了吗，检测波长是不是太低了？

要怎么过度啊？而且用完柱子是不是也应过度啊？
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11楼2012-03-20 20:39:05
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caodetiankun

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2012-03-19 19:05:16:
楼主是用比例阀混合的溶剂还是混合好再用一个泵走的基线啊 可以先把两种流动相按比例混合 再用单泵来走一下呢 可能会使基线平一点

是两个泵啊，问题是我要走梯度啊！
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12楼2012-03-20 20:40:27
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caodetiankun

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by MJF628 at 2012-03-19 21:28:59:
多大的波浪，开空调了么

-5mAu到5mAu
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13楼2012-03-20 20:41:19
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助，欢迎常来~ ^^ 2012-03-22 10:13:44
先按同比例的乙腈水冲柱作为过渡 然后再换成同比例的乙腈-磷酸冲柱 这样会好一点 如果是梯度的话 确实比较麻烦 楼主能不能用三氟乙酸代替磷酸来作为流动相呢？
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14楼2012-03-21 18:31:14
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呵呵zhuzhu

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
soundhorizo: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来~ ^^ 2012-03-22 10:13:33
换换检测时用的饿流动相试试     
我用甲醇-缓冲盐跑基线就是波浪状，换成乙腈-缓冲盐时就正常了~~
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15楼2012-03-21 22:17:23
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pxh5262

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
通常来说基线呈波浪状是压力不稳定引起的，引起压力不稳一般是因为有气泡在泵里，调节流动相比例的时候看看一点一点调，从乙腈百分之百，百分之三到百分之五的比例一点点的加到想要的比例，这样不会常熟气泡；是不是磷酸水溶液和乙腈混合的过程中产生了气泡呢；如果不是，改变磷酸溶液浓度试试看。
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17楼2012-03-26 13:01:46
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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18楼2012-03-26 17:21:21
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