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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

[求助] 用安捷伦分析型HPLC做半制备

如题,请问有没有哪位仁兄这样干过?我们的机器是安捷伦1260的,听工程师说可以接上半制备柱做,如果有做过的,希望不吝赐教,主要有下面几个问题
1. 流通池要不要换?(工程师说不用换,但还是怕怕啊)
2. 流速能开到多少?(泵的流速范围是0.1~10ml/min,但流速大了压力也太大了啊)
3. cosmosil的柱子,10mm*250mm,5um,一般载样量多大呢?

大家给给意见啊,小弟拜谢!
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huazhzh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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西湖醉鱼(金币+1): 欢迎常来,祝元旦快乐 2011-12-31 20:47:27
muxiachuixue(金币+10): ★★★很有帮助 真是详细啊,感动 2012-01-02 15:55:59
可以非常肯定的告诉你,用半制备柱没有任何问题。我们5台1100都是这么用的,已经用7年多了,而且我们泵的最大流量还只是5mL/min. 你们泵的设计最大流量10mL/min 就更没问题了。当然流量是一回事,仪器压力耐受范围又是一回事,具体要用到多少流量要看你仪器系统的最大耐受压。记得我们邻课题组的1200系列的机子,系统承受上限600bar的压力,我们只是400bar而已。我们的经验是Agilent zorbax 9.4*250mm (5 um) 系列的所有柱子(C18,C8,C3,CN,phenyl,diol etc.)即使用能产生最大压力50%的甲醇体系,4mL/min 流量产生的压力都在350bar以下。如果用乙腈体系的话一般压力都在300bar以下。所以你说的柱子型号一般情况用3-4mL/min的流量来分离化合物是非常轻松的事情。
至于进样量,就要看你样品在柱子上的分离度怎么样了,我们分离很近的峰,一般用半制备柱也只能进1-2mg,如果样品分的开得话,进个3-5mg也没问题。不过你说得进10-20mg感觉进样量太大了,这样你的检测就会不准了。
升级个木虫真不容易啊
6楼2011-12-31 20:39:38
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蓝云海

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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muxiachuixue(金币+3): ★★★很有帮助 2011-12-30 12:47:25
流通池不用换,流速看压力来调节,进样量个人认为只要不包含其他东西  平头也无所谓。个人意见
3楼2011-12-29 13:35:00
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普通回帖

fever366

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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muxiachuixue(金币+3): ★★★很有帮助 谢谢,请问进样量能在什么数量级呢 2011-12-30 12:47:59
流通池不用换,我们这里只开到3,我们这里用的安捷伦的c18柱,安捷伦1200
2楼2011-12-29 13:20:53
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝云海 at 2011-12-29 13:35:00:
流通池不用换,流速看压力来调节,进样量个人认为只要不包含其他东西  平头也无所谓。个人意见

请问一针进10~20mg多么?我东西还挺好分的,但是不知道半制备柱一进样量在什么范围
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4楼2011-12-30 12:47:05
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hongbenbo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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分析型HPLC一般开到2~3cc,我以前用的是2。进样量要自己去摸索,可以分得开就OK,平头峰也没关系。流通池不用换。但是,对泵的寿命是有影响的。
5楼2011-12-31 16:14:05
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

内容已删除
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7楼2012-01-02 16:00:40
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huazhzh

木虫 (正式写手)

内容已删除
升级个木虫真不容易啊
8楼2012-01-02 16:06:45
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by huazhzh at 2012-01-02 16:06:45:
耐压值说明书上有吧,如果是这样的话,估计你只能用3ml流速以下,而且用的时候,在泵设置里压力上限设为300bar,这样每次系统超过300bar就会自动停止,以保护柱子。多可惜啊这样,这么贵的仪器买了,却因为柱子的 ...

其他的半制备柱子贵啊,这根cosmosil的是日本的,4800,zobax的我问过安捷伦要一万多,估计老板不舍得
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9楼2012-01-03 11:53:42
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康绍龙

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


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西湖醉鱼(金币+1): 鼓励新人 2012-01-08 20:48:54
流通池不用换,我们这里开到5关键是看你的柱子有多大。。如果柱子大的话可以开大点压力也不是很大。。进样量得看情况看峰形
10楼2012-01-08 19:23:40
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