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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

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[求助] 用安捷伦分析型HPLC做半制备

如题，请问有没有哪位仁兄这样干过？我们的机器是安捷伦1260的，听工程师说可以接上半制备柱做，如果有做过的，希望不吝赐教，主要有下面几个问题
1. 流通池要不要换？（工程师说不用换，但还是怕怕啊）
2. 流速能开到多少？（泵的流速范围是0.1~10ml/min，但流速大了压力也太大了啊）
3. cosmosil的柱子，10mm*250mm，5um，一般载样量多大呢？

大家给给意见啊，小弟拜谢！

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以无法为有法，以无限为有限

1楼 2011-12-29 10:29:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

huazhzh

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★
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西湖醉鱼(金币+1): 欢迎常来，祝元旦快乐 2011-12-31 20:47:27
muxiachuixue(金币+10): ★★★很有帮助真是详细啊，感动 2012-01-02 15:55:59

可以非常肯定的告诉你，用半制备柱没有任何问题。我们5台1100都是这么用的，已经用7年多了，而且我们泵的最大流量还只是5mL/min. 你们泵的设计最大流量10mL/min 就更没问题了。当然流量是一回事，仪器压力耐受范围又是一回事，具体要用到多少流量要看你仪器系统的最大耐受压。记得我们邻课题组的1200系列的机子，系统承受上限600bar的压力，我们只是400bar而已。我们的经验是Agilent zorbax 9.4*250mm （5 um) 系列的所有柱子（C18，C8，C3，CN，phenyl，diol etc.）即使用能产生最大压力50%的甲醇体系，4mL/min 流量产生的压力都在350bar以下。如果用乙腈体系的话一般压力都在300bar以下。所以你说的柱子型号一般情况用3-4mL/min的流量来分离化合物是非常轻松的事情。
至于进样量，就要看你样品在柱子上的分离度怎么样了，我们分离很近的峰，一般用半制备柱也只能进1-2mg，如果样品分的开得话，进个3-5mg也没问题。不过你说得进10-20mg感觉进样量太大了，这样你的检测就会不准了。