24小时热门版块排行榜    

查看: 1746  |  回复: 9
【悬赏金币】回答本帖问题,作者x1989y0205z将赠送您 10 个金币

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE过程漏液已有1人参与

我最近一直做电泳,发现蛋白质条带很弥散,后来一想,是不是内槽的电泳液漏到了外槽。各位大神能帮我确定一下吗?是不是这种情况会严重的影响实验结果啊
SDS-PAGE过程漏液
IMG_20130909_095417.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

加油
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mome7

木虫 (小有名气)

试试调整进样量呢 或者你处理时间长点 不知道你用了多少那个上色 感觉你样品处理的不纯
一直坚强下去才会离幸福越来越近
2楼2013-10-25 12:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四法青云

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2013-10-28 01:14:35
样品可能降解了
要么就是压缩的不够好
3楼2013-10-25 16:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mome7 at 2013-10-25 12:05:16
试试调整进样量呢 或者你处理时间长点 不知道你用了多少那个上色 感觉你样品处理的不纯

我上的10μL,样品是蛋白质和多酚结合后的反应物,我点样量虽然只有10μL,但是加入到点样空的时候都几乎弥散了整个点样空,我猜这个会不会严重影响条带的迁移啊,求您多指点
加油
4楼2013-10-25 20:41:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 四法青云 at 2013-10-25 16:40:48
样品可能降解了
要么就是压缩的不够好

我上样的时候是样品弥散了整个点样空,你说这会影响条带的迁移吗?求您指点
加油
5楼2013-10-25 20:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mome7

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by x1989y0205z at 2013-10-25 20:41:38
我上的10μL,样品是蛋白质和多酚结合后的反应物,我点样量虽然只有10μL,但是加入到点样空的时候都几乎弥散了整个点样空,我猜这个会不会严重影响条带的迁移啊,求您多指点...

它不是沉下去了吗 就是那种刚加进去会有一些飘起来 但是没有跑出点样孔 慢慢加吧 没几秒就沉下去稳定了啊 下面深上面浅些 不知道你说的弥散是个什么程度 我做过的就是提取的纯蛋白 高速离心了下 不过我处理时间短 就半个多小时吧(时间久记得不是太清楚) 我同学做小麦蛋白 处理半天还是大半天 然后她跑的就很好 她不知道哪里弄得方法 我参考的方法没有处理那么久的 我觉得和方法还有处理时间都有关系
一直坚强下去才会离幸福越来越近
6楼2013-10-27 10:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江南的竹

主管区长 (文学泰斗)

优秀区长优秀区长优秀区长文献杰出贡献优秀区长优秀区长文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献优秀区长文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献优秀版主优秀版主文献杰出贡献文献杰出贡献

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 多谢提供! 2013-10-28 01:14:49
希望对你有帮助

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法.doc
  • 2013-10-27 14:50:32, 28.5 K
欢迎光临【文献求助区】交流学习;帖子里遇到任何问题,请点击右下角【通知版主处理】
7楼2013-10-27 14:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mome7 at 2013-10-27 10:13:25
它不是沉下去了吗 就是那种刚加进去会有一些飘起来 但是没有跑出点样孔 慢慢加吧 没几秒就沉下去稳定了啊 下面深上面浅些 不知道你说的弥散是个什么程度 我做过的就是提取的纯蛋白 高速离心了下 不过我处理时间短  ...

您能发个电泳图我看看吗?我的蛋白质里面含有多酚,不知道有么有影响电泳,谢谢您的回复
加油
8楼2013-10-27 23:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四法青云

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by x1989y0205z at 2013-10-25 20:43:04
我上样的时候是样品弥散了整个点样空,你说这会影响条带的迁移吗?求您指点...

这个我感觉不是太大,我是做预制胶的,每天检测跑的比较多,加样也很随意,样品溢出情况都有,感觉没什么影响
9楼2013-10-28 10:36:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的描述  应该是loading buffer的量少了,导致样品的密度较小,点样时下沉速度慢,易扩散。试着增大loading buffer的比例。
10楼2015-03-30 15:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 x1989y0205z 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 我感觉当老师好累啊。。 +9 fairy1122 2024-11-15 9/450 2024-11-15 22:14 by fevil
[论文投稿] chemical science和advanced science哪个好一点 +6 yly150 2024-11-12 6/300 2024-11-15 21:06 by hcj9909053
[论文投稿] 国内期刊审稿人数量 +3 新时代核动力驴 2024-11-13 5/250 2024-11-15 20:37 by 新时代核动力驴
[论文投稿] 找不到审稿人 +6 吉祥如意141913 2024-11-13 6/300 2024-11-15 16:48 by LEyblyt
[精细化工] 同一个反应相同的反应条件,是不是反应结果相差不大? +5 青霉素 2024-11-11 5/250 2024-11-15 13:43 by zyqchem
[有机交流] 二甲胺的使用 20+5 太阳谷 2024-11-14 13/650 2024-11-15 13:11 by xiaomei1031
[硕博家园] 和导师撕破脸了 +16 圆满123456 2024-11-13 20/1000 2024-11-15 10:09 by 小杰1572
[基金申请] 广东省自然科学基金-面上项目消息有了么? +4 pachang 2024-11-14 6/300 2024-11-15 09:39 by zhoulei7170
[基金申请] 求助 +4 Enenenene 2024-11-15 4/200 2024-11-15 09:36 by 榨菜拌青椒
[硕博家园] 课题和专业一点都不相关怎么办 +7 imt4n9 2024-11-11 10/500 2024-11-15 01:55 by 成长虫
[基金申请] 博后基金分组排名 +7 攻城2025 2024-11-14 7/350 2024-11-14 21:19 by 实验小白ha
[论文投稿] 投稿系统中的通讯作者和文章中的通讯作者不一样,文章目前被录用了? +4 babybabygo 2024-11-12 5/250 2024-11-14 19:13 by 走了002
[教师之家] 处在人生职业的分水岭 +4 otani 2024-11-13 4/200 2024-11-14 14:17 by mddzwo
[找工作] 咨询一下江西的高校待遇,人文氛围怎么样? +5 akslis2024 2024-11-09 5/250 2024-11-14 13:53 by 啄木鸟、
[基金申请] 76批博后基金 +3 feiyi3986 2024-11-14 3/150 2024-11-14 11:50 by puly
[论文投稿] 要不要撤稿另投 10+4 wangzhesd 2024-11-09 8/400 2024-11-14 09:09 by LIU_V
[论文投稿] 求JACS和ACIE的最新文章模板 10+4 Jane060390 2024-11-10 4/200 2024-11-13 09:13 by 北京莱茵润色
[基金申请] 浙江省青基怎么看A还是B? +8 ToallGoof 2024-11-11 14/700 2024-11-13 09:11 by Praybest
[论文投稿] renewable energy 添加作者 15+3 Hebauwww12 2024-11-09 4/200 2024-11-11 08:42 by 北京莱茵润色
[基金申请] 要求论文发表日期在项目执行期内,论文发表日期是在线日期还是见刊日期 +6 Jiangnanyu1 2024-11-09 7/350 2024-11-10 17:49 by jurkat.1640
信息提示
请填处理意见