24小时热门版块排行榜    

查看: 1795  |  回复: 9
【悬赏金币】回答本帖问题,作者x1989y0205z将赠送您 10 个金币

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE过程漏液已有1人参与

我最近一直做电泳,发现蛋白质条带很弥散,后来一想,是不是内槽的电泳液漏到了外槽。各位大神能帮我确定一下吗?是不是这种情况会严重的影响实验结果啊
SDS-PAGE过程漏液
IMG_20130909_095417.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

加油
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mome7

木虫 (小有名气)

试试调整进样量呢 或者你处理时间长点 不知道你用了多少那个上色 感觉你样品处理的不纯
一直坚强下去才会离幸福越来越近
2楼2013-10-25 12:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四法青云

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2013-10-28 01:14:35
样品可能降解了
要么就是压缩的不够好
3楼2013-10-25 16:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mome7 at 2013-10-25 12:05:16
试试调整进样量呢 或者你处理时间长点 不知道你用了多少那个上色 感觉你样品处理的不纯

我上的10μL,样品是蛋白质和多酚结合后的反应物,我点样量虽然只有10μL,但是加入到点样空的时候都几乎弥散了整个点样空,我猜这个会不会严重影响条带的迁移啊,求您多指点
加油
4楼2013-10-25 20:41:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 四法青云 at 2013-10-25 16:40:48
样品可能降解了
要么就是压缩的不够好

我上样的时候是样品弥散了整个点样空,你说这会影响条带的迁移吗?求您指点
加油
5楼2013-10-25 20:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mome7

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by x1989y0205z at 2013-10-25 20:41:38
我上的10μL,样品是蛋白质和多酚结合后的反应物,我点样量虽然只有10μL,但是加入到点样空的时候都几乎弥散了整个点样空,我猜这个会不会严重影响条带的迁移啊,求您多指点...

它不是沉下去了吗 就是那种刚加进去会有一些飘起来 但是没有跑出点样孔 慢慢加吧 没几秒就沉下去稳定了啊 下面深上面浅些 不知道你说的弥散是个什么程度 我做过的就是提取的纯蛋白 高速离心了下 不过我处理时间短 就半个多小时吧(时间久记得不是太清楚) 我同学做小麦蛋白 处理半天还是大半天 然后她跑的就很好 她不知道哪里弄得方法 我参考的方法没有处理那么久的 我觉得和方法还有处理时间都有关系
一直坚强下去才会离幸福越来越近
6楼2013-10-27 10:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江南的竹

主管区长 (文学泰斗)

优秀区长优秀区长优秀区长文献杰出贡献优秀区长优秀区长文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献优秀区长文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献优秀版主优秀版主文献杰出贡献文献杰出贡献

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 多谢提供! 2013-10-28 01:14:49
希望对你有帮助

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法.doc
  • 2013-10-27 14:50:32, 28.5 K
欢迎光临【文献求助区】交流学习;帖子里遇到任何问题,请点击右下角【通知版主处理】
7楼2013-10-27 14:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x1989y0205z

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mome7 at 2013-10-27 10:13:25
它不是沉下去了吗 就是那种刚加进去会有一些飘起来 但是没有跑出点样孔 慢慢加吧 没几秒就沉下去稳定了啊 下面深上面浅些 不知道你说的弥散是个什么程度 我做过的就是提取的纯蛋白 高速离心了下 不过我处理时间短  ...

您能发个电泳图我看看吗?我的蛋白质里面含有多酚,不知道有么有影响电泳,谢谢您的回复
加油
8楼2013-10-27 23:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四法青云

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by x1989y0205z at 2013-10-25 20:43:04
我上样的时候是样品弥散了整个点样空,你说这会影响条带的迁移吗?求您指点...

这个我感觉不是太大,我是做预制胶的,每天检测跑的比较多,加样也很随意,样品溢出情况都有,感觉没什么影响
9楼2013-10-28 10:36:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的描述  应该是loading buffer的量少了,导致样品的密度较小,点样时下沉速度慢,易扩散。试着增大loading buffer的比例。
10楼2015-03-30 15:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 x1989y0205z 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 今天是考研的第一天 +5 l4q8i@6n 2024-12-21 8/400 2024-12-22 06:47 by cx265
[论文投稿] 投稿期刊 5+4 王丽媛西西西 2024-12-17 7/350 2024-12-22 04:44 by yudaoqian88
[职场人生] 国企、民企行业不同,如何决择? +3 haihe623 2024-12-19 5/250 2024-12-21 21:42 by haihe623
[论文投稿] 挑数据是造假吗 +5 电话的建设 2024-12-21 5/250 2024-12-21 17:16 by 科研皮皮猪
[基金申请] 高校老师贫富差距越来越来大,有帽子的比没帽子的工资高3倍以上 +18 babu2015 2024-12-16 20/1000 2024-12-21 14:14 by lzg121
[教师之家] 学校排名靠前发展好,最大的受益者是校领导还是普通老师? +6 akslis2024 2024-12-17 7/350 2024-12-21 11:22 by 凌晨一点393
[有机交流] 工艺需求,付费 +4 想当然灬 2024-12-17 6/300 2024-12-21 06:23 by a893069456
[教师之家] 你们都降薪了吗? +10 红枣葡萄干 2024-12-18 10/500 2024-12-20 17:32 by 开心就好56
[考博] 东北石油大学博士招生两名 +4 13305437324 2024-12-15 4/200 2024-12-20 12:30 by 一路禅修
[有机交流] 请问液溴开封后没有密封,放一年会变质吗? +9 rommel1975 2024-12-16 9/450 2024-12-20 11:01 by 2005127239
[找工作] 水电解制氢方向求职 +5 kyle1999 2024-12-19 8/400 2024-12-20 04:48 by 胖胖的大海
[论文投稿] Molecular Crystals and Liquid Crystals投稿8个月没有信息 +4 书剑如风 2024-12-17 12/600 2024-12-20 04:40 by 胖胖的大海
[论文投稿] 求推荐5分二区以上肿瘤接受生信结合实验的期刊。。。 +3 lice_1987 2024-12-17 6/300 2024-12-19 17:01 by Andy_124
[基金申请] 除了评职称,除了考评,你对社科项目是什么态度? +9 xinrenxf 2024-12-16 15/750 2024-12-19 11:31 by cwwqt
[论文投稿] 毕业论文疑虑 20+6 风吹荷叶煞 2024-12-17 17/850 2024-12-18 17:35 by holypower
[有机交流] 核磁氢谱分析 +3 然虫 2024-12-16 4/200 2024-12-18 15:52 by 小肉干
[考博] 招收2025级博士 +3 cake1 2024-12-15 5/250 2024-12-18 10:59 by cake1
[论文投稿] 小论文投稿求助 100+3 容城侯 2024-12-16 4/200 2024-12-17 17:07 by 大发财树
[论文投稿] 申博 +3 翟某人 2024-12-16 3/150 2024-12-17 09:24 by xs74101122
[硕博家园] 大连海事大学双一流学科招收2025年博士研究生 +3 steresewan 2024-12-15 3/150 2024-12-16 00:17 by luweidong401
信息提示
请填处理意见