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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » RT-PCR 电泳图
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jinxin805080

新虫 (初入文坛)

[交流] RT-PCR 电泳图

用反转录的cDNA PCR （目的条带为500bp)，结果不是想要的条带。。。不知什么原因 是引物的是事还是。。。请高人指点
RT-PCR 电泳图
2013-10-23 第一次cDNA-PCR电泳(normal primer)-1.jpg marker DL2000


RT-PCR 电泳图-1
上游引物jpg.jpg


RT-PCR 电泳图-2
下游引物jpg.jpg
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1楼 2013-10-23 22:05:47
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jinxin805080

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by eagles123 at 2013-10-23 23:48:57
可能是引物，Tm差了3度 换几个退火温度试试， 不要用cDNA试， 直接用基因组DNA跑 看能不能出目标条带

梯度PCR也做了 结果也都差不多。。。我现在是要构建真核表达载体 提取RNA 反转录再PCR 哎 做了一个多星期了 什么都没做出来。。
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3楼2013-10-31 13:21:57
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eagles123

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是引物，Tm差了3度 换几个退火温度试试， 不要用cDNA试， 直接用基因组DNA跑 看能不能出目标条带
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2楼2013-10-23 23:48:57
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xiaobailyz

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问lz找到原因了吗？遇到貌似差不多的问题……
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4楼2013-11-07 20:31:28
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