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新虫 (小有名气)

[交流] 毕赤酵母细胞如何破碎 已有10人参与

各位大侠:
     毕赤酵母细胞如何破碎?和酿酒酵母破壁方法一样吗?求赐教
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20083630zhan

木虫 (正式写手)


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我最近也在做毕赤酵母提取胞内蛋白和基因组,细胞很难破碎啊
2楼2013-10-23 17:45:32
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761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 20083630zhan at 2013-10-23 17:45:32
我最近也在做毕赤酵母提取胞内蛋白和基因组,细胞很难破碎啊

你用什么方法破的呢
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
3楼2013-10-23 19:40:33
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20083630zhan

木虫 (正式写手)


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最近用的是TARAKA 的酵母总蛋白提取试剂,但是挺贵的,现在正在找其他方法
4楼2013-10-23 20:14:26
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同东中郎将

新虫 (小有名气)


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超声波破碎,高压均质破碎,都可以吧
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
5楼2013-10-24 09:18:39
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

不知道液氮研磨能行不
6楼2013-10-24 09:24:25
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these119

新虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-28 00:50:34
可以用玻璃珠研磨法,还可以用超声破碎法,其他的如酶解,TAC萃取法什么的,没试过
7楼2013-10-24 09:39:21
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DBWJ

金虫 (小有名气)


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用蜗牛酶处理下试试
8楼2013-10-24 10:06:16
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phoenix211

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+5, 鼓励回帖应助! 2013-10-28 00:50:43
gyesang: 回帖置顶 2013-10-28 00:50:48
用玻璃珠涡旋的。
以前提毕赤酵母DNA时,是用SDS-Triton溶液破的。
9楼2013-10-24 10:26:16
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yipan

铜虫 (职业作家)


★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流经验! 2013-10-28 00:50:59
一般我们操作时是把液氮先倒入一个大研钵,再把“酵母泥稀稀”滴加到里面,会形成小颗粒和絮状凝固物。然后再研磨,研磨过程中可以多次添加液氮,液氮挥发干时再研磨,重复三四次就OK了。
10楼2013-10-24 10:51:23
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