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求助用超声波破碎细胞
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| 用超声波破碎细胞为何会产生白色沉淀，那是细胞团吗？要超声多久才会使得这种现象消失，溶液变澄清？ |
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2楼2011-07-26 10:48:43
3楼2011-07-26 14:39:49
【答案】应助回帖
★ ★ ★
fanger(金币+1): 2011-07-26 19:02:26
fanger(金币+1): 这个我都很清楚，我搞的是肿瘤细胞或动物细胞，白色沉淀是如何产生的？不是用生理盐水收集细胞再超声的吗？各位大侠，求详解，关键的，急！实验迫在眉睫！ 2011-07-26 19:08:17
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-07-26 20:52:09
fanger(金币+1): 2011-07-26 19:02:26
fanger(金币+1): 这个我都很清楚，我搞的是肿瘤细胞或动物细胞，白色沉淀是如何产生的？不是用生理盐水收集细胞再超声的吗？各位大侠，求详解，关键的，急！实验迫在眉睫！ 2011-07-26 19:08:17
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-07-26 20:52:09
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是超什么细胞？大肠杆菌还是293T之类的细胞？超声的时间和样品的多少和体积有关，一般来说，如果是纯化蛋白超声大肠杆菌，800ML培养基收集的菌，我用的是400-600W，超三秒，停15秒一个循环，超半个小时左右，记得一定要加蛋白酶抑制剂，冰水浴。 如果是细胞，一个10cm的培养皿收集下来的细胞，用200W，超两秒，停10秒，只用超10个循环左右就足够了，蛋白酶抑制剂可加可不加，因为加了会改变样品组成，而且如果一直保持在冰上操作，基本不会有什么降解。 你的样品是超声之后才出现白色沉淀的吗？很有可能是蛋白变性后形成的聚集体，超声过程要注意冰水浴，工作时间尽量短，间隔时间长，让样品有足够的时间冷却，超声的产热是很厉害的。 |
4楼2011-07-26 16:51:41
loveskyzhou
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【答案】应助回帖
fanger(金币+1): 超声的是动物细胞或肿瘤细胞，非细菌！！如何解决这种情况！！ 2011-07-26 19:06:22
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白色沉淀是不是蛋白沉了啊，BUFFER离子浓度会不会太低，超声方法楼上就好 |
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loveskyzhou5楼2011-07-26 18:29:06
loveskyzhou
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6楼2011-07-26 19:15:58
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mxy19920412
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