应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助用超声波破碎细胞
81/1返回列表
查看: 2620  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fanger

银虫 (小有名气)

[求助] 求助用超声波破碎细胞

用超声波破碎细胞为何会产生白色沉淀，那是细胞团吗？要超声多久才会使得这种现象消失，溶液变澄清？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
做好自己！
1楼 2011-07-26 09:10:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海绵控

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): 鼓励新虫交流 2011-07-26 11:02:19
fanger(金币+1): 2011-07-26 19:02:08
我破碎过植物根（茉莉根），干品，用的条件最高一个是600W，一般超声时间超过好像是半个小时细胞就会有被破坏的可能，我摸索过的条件是从十分钟开始到两个半小时，效果最好的是半个小时，
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-26 10:48:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

101202139

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
fanger(金币+1): 2011-07-26 19:02:18
dhd997(金币+2): 鼓励经验交流 2011-07-26 20:51:58
我做的几种蛋白，有的用超生破碎的方法，效果挺好，但是有的就不怎么样，我就通过高压破碎的方法，效果还可以，至少比超生破碎的好。你可以尝试一下……
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-07-26 14:39:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicole1124

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
fanger(金币+1): 2011-07-26 19:02:26
fanger(金币+1): 这个我都很清楚，我搞的是肿瘤细胞或动物细胞，白色沉淀是如何产生的？不是用生理盐水收集细胞再超声的吗？各位大侠，求详解，关键的，急！实验迫在眉睫！ 2011-07-26 19:08:17
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-07-26 20:52:09
是超什么细胞？大肠杆菌还是293T之类的细胞？超声的时间和样品的多少和体积有关，一般来说，如果是纯化蛋白超声大肠杆菌，800ML培养基收集的菌，我用的是400-600W，超三秒，停15秒一个循环，超半个小时左右，记得一定要加蛋白酶抑制剂，冰水浴。 如果是细胞，一个10cm的培养皿收集下来的细胞，用200W，超两秒，停10秒，只用超10个循环左右就足够了，蛋白酶抑制剂可加可不加，因为加了会改变样品组成，而且如果一直保持在冰上操作，基本不会有什么降解。

你的样品是超声之后才出现白色沉淀的吗？很有可能是蛋白变性后形成的聚集体，超声过程要注意冰水浴，工作时间尽量短，间隔时间长，让样品有足够的时间冷却，超声的产热是很厉害的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-07-26 16:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

fanger(金币+1): 超声的是动物细胞或肿瘤细胞，非细菌！！如何解决这种情况！！ 2011-07-26 19:06:22
引用回帖:
Originally posted by fanger at 2011-07-26 09:10:31:
用超声波破碎细胞为何会产生白色沉淀，那是细胞团吗？要超声多久才会使得这种现象消失，溶液变澄清？

白色沉淀是不是蛋白沉了啊，BUFFER离子浓度会不会太低，超声方法楼上就好
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

loveskyzhou
我会绕一个圈，走回到实验室
5楼2011-07-26 18:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by loveskyzhou at 2011-07-26 18:29:06:
白色沉淀是不是蛋白沉了啊，BUFFER离子浓度会不会太低，超声方法楼上就好

哦。。。。这方面不熟悉不敢瞎说，同求解
赞一下 回复此楼
我会绕一个圈，走回到实验室
6楼2011-07-26 19:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a198469327

新虫 (初入文坛)
请问楼主是产生絮状沉淀还是普通的菌体白色沉淀
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-30 09:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxy19920412

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by nicole1124 at 2011-07-26 16:51:41
是超什么细胞？大肠杆菌还是293T之类的细胞？超声的时间和样品的多少和体积有关，一般来说，如果是纯化蛋白超声大肠杆菌，800ML培养基收集的菌，我用的是400-600W，超三秒，停15秒一个循环，超半个小时左右，记得一 ...

请问破细胞的话探头必须要用2mm的吗？我们的探头比较大可不可以啊？
赞一下 回复此楼
8楼2016-09-23 16:54:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fanger 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +8 不知道叫什么！ 2026-03-15 9/450 2026-03-16 07:45 by L135790
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 一志愿天大化工（085600）调剂总分338 +6 蔡大美女 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:46 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 泣血叩求调剂恩，愿以丹心报师恩 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭