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考马斯亮蓝法测蛋白质，麻烦进来看一下吧
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做过考马斯亮蓝的各位大虫，帮我看看我哪里出错了吧。我连续过了两天多，标准曲线总是做不出来。 考马斯亮蓝溶液配制：考马斯亮蓝G―250 50mg溶于25mL 95%乙醇中，加入50mL 85%磷酸，用蒸馏水稀释至500mL。然后用0.45um滤膜过滤使用。溶液配好后还有一个问题，考马斯亮蓝加入乙醇磷酸后边砖红色，但是一旦加入水就变成蓝色了，这样的考马斯亮蓝溶液可以用吗？ 蛋白质标准溶液配制：25mg牛血清白蛋白+250ml蒸馏水 定容，母液浓度为0.1mg/ml。 检测：分别取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml蛋白质溶液，分别加去离子水至1ml，然后加考马斯亮蓝各5ml。 结果：吸光度测了N遍，但结果大体都是1号到6号：0.622 0.654 0.719 0.609 0.546 0.729 （只选取一次检测结果） 我都郁闷了 不知道问题出在哪里。。。各位大神帮忙看看到底是哪里出了错吧！！！谢谢看完！有点长！ |
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