应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » ＤＧＧＥ银染问题
131/2返回列表12下一页
查看: 1606  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

doubleping

新虫 (小有名气)

[求助] ＤＧＧＥ银染问题 已有1人参与

我的ＤＧＧＥ胶用银染方法染色，背景很干净，但是泳道颜色很深，有什么方法可以让用淡颜色淡点吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-13 09:11:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 爱吃鱼l at 2014-02-28 15:25:58
现在我还在纠结中呢， 您说的是显影时甲醛的用量吗？可不可以把你染色的配方及方法发给我，谢谢！！
...

试剂配方
10% HAC             50ml HAC（冰醋酸）+450ml dH2O
1%硝酸               5ml 硝酸+495ml dH2O
0.2%硝酸银            1g硝酸银+500ml dH2O+500ul甲醛
2.5%碳酸钠           12.5g碳酸钠+250ul甲醛+500ml dH2O

步骤
a、小心将胶卸下，留在大板上
b、放入500ml 10%乙酸中摇晃20min固定
c、小心将胶取出，将盆洗净
d、放入500ml 1%硝酸溶液中摇晃固定10分钟
e、500ml蒸馏水洗三次，摇晃
f、加入500ml 0.2%硝酸银溶液，温室中黑暗摇晃20-30分钟
g、取出胶用500ml蒸馏水洗涤10秒
h、加入2.5%预冷的碳酸钠溶液摇晃条带显出
i、用蒸馏水清洗，拍照
备注: e步骤第二次水洗一定要超过5分钟，这样胶不易碎，其他两次随意
g步骤，先用水洗一次，10s
把水倒掉，在洗一次，15-20s，这样背景就不会很黑
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2014-02-28 20:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-13 19:39:02
泳道颜色深可能是前期PCR的原因，出现非特异扩增~
如果不是，可能是染色出现问题，可能是银染之后水洗的时间不够~
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-13 10:52:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lhf903 at 2013-10-13 10:52:32
泳道颜色深可能是前期PCR的原因，出现非特异扩增~
如果不是，可能是染色出现问题，可能是银染之后水洗的时间不够~

银染后水洗六次了，还是一样，可能是产物问题，只是不知道该怎么解决？有什么办法吗？
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-14 18:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-14 20:50:27
可以试试用PCR产物纯化试剂盒，上样前在按一定比例混和loading buffer
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-14 19:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lhf903 at 2013-10-14 19:01:45
可以试试用PCR产物纯化试剂盒，上样前在按一定比例混和loading buffer

恩恩，我也正有此意，再问下，纯化试剂盒哪个牌子的比较好
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-16 20:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱吃鱼l

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问你DGGE背景色暗的问题解决了吗，是那一步骤出的问题，我现在做DGGE也遇到这问题了，不知怎么解决呢？还请楼主赐教，拜谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-02-20 21:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 爱吃鱼l at 2014-02-20 21:58:15
请问你DGGE背景色暗的问题解决了吗，是那一步骤出的问题，我现在做DGGE也遇到这问题了，不知怎么解决呢？还请楼主赐教，拜谢！

我可能是甲醛加多了，后面减少就好了
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-28 10:06:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 爱吃鱼l at 2014-02-20 21:58:15
请问你DGGE背景色暗的问题解决了吗，是那一步骤出的问题，我现在做DGGE也遇到这问题了，不知怎么解决呢？还请楼主赐教，拜谢！

我可能是甲醛加多了，后面减少就好了
赞一下 回复此楼
8楼2014-02-28 10:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 爱吃鱼l at 2014-02-20 21:58:15
请问你DGGE背景色暗的问题解决了吗，是那一步骤出的问题，我现在做DGGE也遇到这问题了，不知怎么解决呢？还请楼主赐教，拜谢！

我可能是甲醛加多了，后面减少就好了
赞一下 回复此楼
9楼2014-02-28 10:06:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 爱吃鱼l at 2014-02-20 21:58:15
请问你DGGE背景色暗的问题解决了吗，是那一步骤出的问题，我现在做DGGE也遇到这问题了，不知怎么解决呢？还请楼主赐教，拜谢！

我可能是甲醛加多了，后面减少就好了
赞一下 回复此楼
10楼2014-02-28 10:07:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 doubleping 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +9 小熊joy 2026-03-14 9/450 2026-03-18 04:33 by anny19840123
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 3/150 2026-03-18 00:13 by PY-Hzb
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +7 yangfz 2026-03-17 7/350 2026-03-17 23:57 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +9 冬十三 2026-03-15 10/500 2026-03-17 22:53 by lbsjt
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭