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doubleping

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE银染问题 已有1人参与

我的DGGE胶用银染方法染色,背景很干净,但是泳道颜色很深,有什么方法可以让用淡颜色淡点吗?
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爱吃鱼l

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by doubleping at 2014-02-28 10:07:05
我可能是甲醛加多了,后面减少就好了...

现在我还在纠结中呢, 您说的是显影时甲醛的用量吗?可不可以把你染色的配方及方法发给我,谢谢!!

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2014-02-28 15:25:58
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查看全部 13 个回答

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-13 19:39:02
泳道颜色深可能是前期PCR的原因,出现非特异扩增~
如果不是,可能是染色出现问题,可能是银染之后水洗的时间不够~
2楼2013-10-13 10:52:32
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doubleping

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lhf903 at 2013-10-13 10:52:32
泳道颜色深可能是前期PCR的原因,出现非特异扩增~
如果不是,可能是染色出现问题,可能是银染之后水洗的时间不够~

银染后水洗六次了,还是一样,可能是产物问题,只是不知道该怎么解决?有什么办法吗?
3楼2013-10-14 18:25:58
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-14 20:50:27
可以试试用PCR产物纯化试剂盒,上样前在按一定比例混和loading buffer
4楼2013-10-14 19:01:45
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