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玻璃杯three

金虫 (小有名气)

[求助] 感受态制备及转化

我是新手，最近在做感受态细胞制备及转化 ，在转化的过程中，对照组质粒+CaCl2 的单抗（cml）老是长菌，不知道什么原因？我自己已经重复做了三次了，都还是一样的结果，我的CaCl2已经灭过菌，跟我一起做实验的另一个同学也用的一样的CaCl2 都没出现染菌现象，就我的出现了，我的倒平板的培养基也是刚，灭过菌的，想来想去，都没想到怎么回事？求大神指导
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1楼 2013-10-10 09:31:17
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回帖置顶 ( 共有1个 )

blueghost2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-10 10:42:02
玻璃杯three: 金币+10, ★有帮助 2013-10-10 16:42:12
gyesang: 回帖置顶 2013-10-10 17:18:23
玻璃杯three: 金币+5 2013-11-19 12:01:14
玻璃杯three: 金币+15 2013-11-20 15:06:55
应该是你的操作问题，有些细节你没有注意，但自己有没有发现，建议让其他人监督你做一遍。制备感受态最怕杂菌污染，各个方面都需要注意，冻存时用的甘油，离心时用的离心管，分装时用的EP管等等都要灭菌。。
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3楼2013-10-10 10:15:54
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匿名

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★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-10 10:01:51
本帖仅楼主可见
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2楼2013-10-10 09:44:02
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by blueghost2 at 2013-10-10 10:15:54
应该是你的操作问题，有些细节你没有注意，但自己有没有发现，建议让其他人监督你做一遍。制备感受态最怕杂菌污染，各个方面都需要注意，冻存时用的甘油，离心时用的离心管，分装时用的EP管等等都要灭菌。。

谢谢  我也发现了问题 确实是我的操作问题  准备重新开始做
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4楼2013-10-10 16:43:19
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 198903133397 at 2013-10-10 09:44:02
那只能说明你的操作有问题

恩 我发现了是我的操作问题了  非常感谢
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5楼2013-10-10 16:43:47
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