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wei_suzhen新虫 (小有名气)
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感受态细胞制备 已有1人参与
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| 用氯化钙制备感受态细胞时，怎样避免污染？注意事项是什么? |
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个人意见，仅供参考！ 1.氯化钙最好现用现配，尽量别用高温灭菌，过滤更好； 2.像你养细菌一样，注意就好，比如尽量不要手在瓶口上方活动，要用的东西放在一个地方，用过的地方放在另一个地方等等； 3.其实一般情况下，做感受态不会染菌的，就算染了，之后你用感受态做转化的时候也会被选择培养基平板的抗生素杀灭掉，这之前感受态都是放在超低温冰箱中的，杂菌也长不了；这温度要是真长了杂菌，麻烦把那个杂菌给我发一份，不胜感激！  4.像楼上说的，实践出真知，做几次就知道该注意哪些了。 |
7楼2012-10-31 11:54:02
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1，氯化钙灭菌 2，在超净台中操作 3，各个步骤小心。 其实很多实验室都不是很仔细，如果你自己做一次成功了，你就知道怎么样了，知道注意事项了。实践中学，刚刚开始的顾虑和疑问就自然而然的消失了。祝顺利。 |
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wei_suzhen2楼2012-10-31 01:36:13
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我个人做下来感觉是快与冷是最重要的，反而染菌是罕见的情况…… 只要你摇的种子液没污染，基本上就不会污染，LB里面没有多少菌能竞争过大肠杆菌的。 影响效率的关键就在于配溶液的时候容器要洗干净，水用干净的水，尽量快地完成菌体洗涤分装冻存的步骤。 |
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8楼2012-10-31 17:06:04
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