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玻璃杯three

金虫 (小有名气)

[求助] 感受态制备及转化

我是新手,最近在做感受态细胞制备及转化 ,在转化的过程中,对照组质粒+CaCl2 的单抗(cml)老是长菌,不知道什么原因?我自己已经重复做了三次了,都还是一样的结果,我的CaCl2已经灭过菌,跟我一起做实验的另一个同学也用的一样的CaCl2 都没出现染菌现象,就我的出现了,我的倒平板的培养基也是刚,灭过菌的,想来想去,都没想到怎么回事?求大神指导
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by blueghost2 at 2013-10-10 10:15:54
应该是你的操作问题,有些细节你没有注意,但自己有没有发现,建议让其他人监督你做一遍。制备感受态最怕杂菌污染,各个方面都需要注意,冻存时用的甘油,离心时用的离心管,分装时用的EP管等等都要灭菌。。

谢谢  我也发现了问题 确实是我的操作问题  准备重新开始做
4楼2013-10-10 16:43:19
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查看全部 5 个回答

匿名

用户注销 (正式写手)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-10 10:01:51
本帖仅楼主可见
2楼2013-10-10 09:44:02
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blueghost2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-10 10:42:02
玻璃杯three: 金币+10, 有帮助 2013-10-10 16:42:12
gyesang: 回帖置顶 2013-10-10 17:18:23
玻璃杯three: 金币+5 2013-11-19 12:01:14
玻璃杯three: 金币+15 2013-11-20 15:06:55
应该是你的操作问题,有些细节你没有注意,但自己有没有发现,建议让其他人监督你做一遍。制备感受态最怕杂菌污染,各个方面都需要注意,冻存时用的甘油,离心时用的离心管,分装时用的EP管等等都要灭菌。。
3楼2013-10-10 10:15:54
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 198903133397 at 2013-10-10 09:44:02
那只能说明你的操作有问题

恩 我发现了是我的操作问题了  非常感谢
5楼2013-10-10 16:43:47
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