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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求关于T7 RNA polymerase转录的问题
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murphyLW

木虫 (正式写手)

[求助] 急求关于T7 RNA polymerase转录的问题

我要设计一段dsDNA作为转录模板，3部分：T7 promotor，转录区，T7 terminor（TAA）。我不清楚的是：
1、转录区有限制最少才能转录吗？比如，10个碱基能转录成相应的RNA链吗？
2、TAA终止的话，是直接到这就停了，还是转录完（UTT？UAA？）才停呢？
3、只有单链也能进行T7依赖的转录吗？

急求，大神帮忙
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1楼 2013-09-26 16:07:27
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murphyLW

木虫 (正式写手)
求大神帮忙呀
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2楼2013-09-26 16:20:55
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-27 17:08:52
我觉得你要是10个碱基的话直接买合成的RNA就好了,没必要转录
至于终止的话,是不存在转录RNA的中止密码子的,我印象里如果是in vitro反应的话会一直转录到DNA的3'端或者T7 terminator,你最好先把质粒用酶切一下再转录
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2013-09-26 22:08:15
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murphyLW

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-09-26 22:08:15
我觉得你要是10个碱基的话直接买合成的RNA就好了,没必要转录
至于终止的话,是不存在转录RNA的中止密码子的,我印象里如果是in vitro反应的话会一直转录到DNA的3'端或者T7 terminator,你最好先把质粒用酶切一下再转录

不是我想要的答案呀。
就是需要转录短片段；没T7 terminator是不是把整个模板链转录完？
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4楼2013-09-27 10:00:08
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
murphyLW: 金币+10, ★★★很有帮助, OK 2013-09-27 15:17:39
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-27 17:09:03
引用回帖:
4楼: Originally posted by murphyLW at 2013-09-27 10:00:08
不是我想要的答案呀。
就是需要转录短片段；没T7 terminator是不是把整个模板链转录完？...

是啊,如果没有T7 terminator就一直转录到头了
不过你要是只有10个碱基, 那T7 terminator本身就20来个碱基, 比你要转录的部分还长,这么合成不比化学合成强, 没意义啊
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2013-09-27 10:17:46
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