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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 引物有两个起始密码子
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林默泪

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物有两个起始密码子

请教，我在设计一个引物，需要用到Nde1和BamH1这两个酶切位点，但是NdeI酶切位点（CATATG）本身就带了一个起始密码子，之后紧接着目的基因的编码区也是ATG，这个对实验有没有影响，我的实验是关于克隆表达酶的。
上游引物设计如下：GGGAATTCCATATG ATGGAGCAGTTATCTCTGGAG
前面时保护碱基和识别位点，后面是目的基因。
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1楼 2013-09-23 14:10:15
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-24 21:30:26
对酶的活性应该没有太大影响，就是第一个Met会被切掉，还剩一个Met是你的第一个氨基酸
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2013-09-23 15:55:28
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-28 02:17:50
如果你还没有设计的话，应该把其中一个ATG去掉，这样和原来蛋白一致了，如果引物都到了，就算了
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行至水穷处，坐看云起时
3楼2013-09-23 15:56:56
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