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浅小尘

木虫 (正式写手)

麦兜

[求助] 求助考马斯亮蓝法测蛋白质的浓度

求助一个问题  在使用考马斯亮法测定蛋白质的浓度时,测定标准曲线所用的蛋白质要和待测蛋白质要用同一个吗?还是不管待测蛋白质是什么?标准曲线都可以用牛血清蛋白(BSA)来做。求大神答疑,非常感谢
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叶散的时候,你明白欢聚;花谢的时候,你明白青春。
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weebug

版主 (著名写手)

用牛血清蛋白(BSA)来做标准。
天蓝蓝兮日头晒
2楼2013-09-21 20:20:04
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浅小尘

木虫 (正式写手)

麦兜

引用回帖:
2楼: Originally posted by weebug at 2013-09-21 20:20:04
用牛血清蛋白(BSA)来做标准。

测定其他蛋白质的浓度  也要用BSA来做对吗  我要测定转铁蛋白的浓度 也得用BSA对吧  可以用转铁蛋白来做吗
叶散的时候,你明白欢聚;花谢的时候,你明白青春。
3楼2013-09-21 20:47:58
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chenyyy

无虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为 595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合.
所以要看你的蛋白氨基酸的组成,我遇到的用BSA作标准品来测 免疫球蛋白IgG就不可行
4楼2013-09-21 21:48:00
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浅小尘

木虫 (正式写手)

麦兜

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenyyy at 2013-09-21 21:48:00
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰(lmax)的位置,由465nm变为 595nm,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。染料主要是与蛋白质 ...

请教一下 如果是是测转铁蛋白(TF)的话可以用BSA来做标准曲线吗?谢谢
叶散的时候,你明白欢聚;花谢的时候,你明白青春。
5楼2013-09-22 08:47:24
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
标准蛋白都是用牛血清蛋白的,但用考马斯法测的蛋白也都是水溶性的蛋白质
事实证明,除了你自己,不要指望任何一个人
6楼2013-09-23 09:03:21
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weebug

版主 (著名写手)

也可用转铁蛋白(TF)成品做标准曲线。
天蓝蓝兮日头晒
7楼2013-09-23 10:39:11
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