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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助考马斯亮蓝法测蛋白质的浓度
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浅小尘

木虫 (正式写手)

麦兜

[求助] 求助考马斯亮蓝法测蛋白质的浓度

求助一个问题  在使用考马斯亮法测定蛋白质的浓度时，测定标准曲线所用的蛋白质要和待测蛋白质要用同一个吗？还是不管待测蛋白质是什么？标准曲线都可以用牛血清蛋白（BSA）来做。求大神答疑，非常感谢
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叶散的时候，你明白欢聚；花谢的时候，你明白青春。
1楼 2013-09-21 20:12:14
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weebug

版主 (著名写手)
用牛血清蛋白（BSA）来做标准。
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天蓝蓝兮日头晒
2楼2013-09-21 20:20:04
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浅小尘

木虫 (正式写手)

麦兜
引用回帖:
2楼: Originally posted by weebug at 2013-09-21 20:20:04
用牛血清蛋白（BSA）来做标准。

测定其他蛋白质的浓度  也要用BSA来做对吗  我要测定转铁蛋白的浓度 也得用BSA对吧  可以用转铁蛋白来做吗
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叶散的时候，你明白欢聚；花谢的时候，你明白青春。
3楼2013-09-21 20:47:58
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chenyyy

无虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰(lmax)的位置，由465nm变为 595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合.
所以要看你的蛋白氨基酸的组成,我遇到的用BSA作标准品来测 免疫球蛋白IgG就不可行
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4楼2013-09-21 21:48:00
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浅小尘

木虫 (正式写手)

麦兜
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenyyy at 2013-09-21 21:48:00
考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰(lmax)的位置，由465nm变为 595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。染料主要是与蛋白质 ...

请教一下 如果是是测转铁蛋白（TF）的话可以用BSA来做标准曲线吗？谢谢
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叶散的时候，你明白欢聚；花谢的时候，你明白青春。
5楼2013-09-22 08:47:24
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
标准蛋白都是用牛血清蛋白的，但用考马斯法测的蛋白也都是水溶性的蛋白质
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事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
6楼2013-09-23 09:03:21
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weebug

版主 (著名写手)
也可用转铁蛋白（TF）成品做标准曲线。
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天蓝蓝兮日头晒
7楼2013-09-23 10:39:11
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